梅花（Prunus mume）作为我国的十大传统名花之一,因其树形特异、花色多样、傲雪绽放的特性深受广大人民所喜爱。然而,受抗寒能力所限,只有少数梅花品种能在我国北方部分地区露地栽培。因而,挖掘与梅花抗寒相关的关键调控因子,进而培育耐寒梅花品种,克服低温对梅花地理分布的制约有着重大意义。本实验将梅花与拟南芥中的R2R3-MYB转录因子构建系统进化树,找出与AtMYB15同源的梅花基因。接着以‘美人’梅作为材料,克隆PmMYB15基因,检测了低温下该基因的表达情况。同时构建超量表达载体,并通过农杆菌介导的花序浸染法获得转基因拟南芥植株,根据转基因植株在低温胁迫下的生长状况以及表型变化等对所转基因进行功能验证。所得主要结果如下:1、梅花PmMYB基因的识别与系统进化树的构建。在256个梅花预选MYB基因中筛选出204个MYB基因,将其分为以下四类:1R-MYB型、R2R3-MYB型、3R-MYB型、MYB-related型。其中,1R-MYB型共计74个,R2R3-MYB型共计106个,3R-MYB型共计4个,MYB-related型共计20个。将拟南芥126个R2R3-MYB同梅花106个R2R3-MYB构建系统进化树,初步确定与AtMYB15同源的梅花基因4个。2、PmMYB15基因在梅花幼叶受低温胁迫下的表达分析。看家基因EF1α在整个实验过程中,其表达量始终保持稳定。PmMYB15a、PmMYB15b和PmMYB15c三个基因的表达量趋势大致表现为从无到有,再略有下降,表达峰值集中出现在12h左右。PmMYB15d基因则表现为从有到无,逐渐减弱表达的趋势3、转PmMYB15基因拟南芥的低温胁迫分析。转基因拟南芥相比野生型在表型等方面具有明显的不同,主要表现在前者发芽较晚,长势较弱,叶片常出现卷曲,叶片绿色更深等等。在低温胁迫中,转基因拟南芥相比野生型有着更高的存活率,分别为:转PmMYB15a基因37.96%、转PmMYB15b基因29.85%、转PmMYB15c基因74.60%以及转PmMYB15d基因1.67%。