论文部分内容阅读
目前,蛋白多肽类药物的临床使用仍以注射给药为主,这给患者造成了巨大的痛楚和心里负担。由此,拓展蛋白多肽类药物的其他给药手段显得非常迫切且意义重大。其中口服给药因其风险较小、使用方便、患者顺应性好而受到广泛的关注。胶原肽是来源于胶原蛋白的多肽类生物活性分子,具有抗氧化、美容护肤、改善骨骼等功效。但口服胶原肽在胃肠道中不稳定,易被酸解酶解,生物利用度低。本文针对以上问题拟研制胶原肽海藻酸钙/壳聚糖(SA/CTS)口服肠溶微球,使胶原肽口服后在消化道中更加稳定,并通过改善微球制剂的肠道粘附性,以改善胶原肽肠道吸收性能,提高其生物利用度。主要开展的研究工作如下:(1)分别采用双乳法和喷雾凝聚法制备了载胶原肽SA/CTS微球,并进行了处方、制备工艺优化和理化性质表征。实验结果表明,双乳化法制备的微球成球性好,粒径小且分布均一,海藻酸钙(SA)微球中值粒径为3.5μm,SA/CTS微球中值粒径为4.5μm。喷雾凝聚法制得的SA/CTS微球性状差,粒径较大,为162.8μm,经筛子分为200μm SA/CTS微球和500μm SA/CTS微球。双乳化法制得的SA微球、SA/CTS微球载药量分别是7.83%、4.50%;喷雾凝聚法制备200μm和500μm SA/CTS微球载药量分别为5.33%和6.40%。体外释放研究表明,喷雾凝聚法制备的SA/CTS微球在模拟肠液中3 h全部释放;双乳化法制备的微球释放相对较缓,该法制备SA/CTS微球3 h时累积释放量为70%左右,8 h几乎全部释放。(2)采用小肠外翻肠囊法和分肠段单向灌流法,研究了胶原肽肠溶微球的肠吸收行为。结果表明,胶原肽SA/CTS微球能显著改善胶原肽的肠吸收,其吸收效果与微球粒径呈相关性。外翻肠囊实验显示不同粒径SA/CTS微球在小肠各部位的吸收趋势为500μm SA/CTS微球<200μm SA/CTS微球<10μm SA/CTS微球。与10μm SA微球相比,小肠各肠段对10μm SA/CTS微球组胶原肽的吸收显著提高(p<0.05),说明壳聚糖的粘附特性能显著改善微球制剂胶原肽的小肠吸收。(3)动物功效评价实验显示,胶原肽微球制剂无毒副作用,安全性良好。各实验组小鼠皮肤生理指标与对照组相比无统计学差异(P>0.05),这可能与实验给药时间较短(28天)有关。皮肤组织一般形态学和皮肤组织胶原形态学观察表明,各给药组均能改善皮肤胶原纤维层,显示了胶原肽的护肤功效。