论文部分内容阅读
中药何首乌为蓼科Polygonaceae蓼属Polygonum植物何首乌Polygonummultiflorum Thunb.的干燥块根，具有解毒，消痈，截疟，润肠通便等功效，临床上用于疮痈，瘰疬，风疹瘙痒，久疟体虚，肠燥便秘；中药制何首乌为何首乌的炮制加工品，可补肝肾，益精血，乌须发，强筋骨，用于血虚萎黄，眩晕耳鸣，须发早白，腰膝酸软，肢体麻木，崩漏带下，久疟体虚；高血脂。为进一步明确炮制对何首乌化学成分的影响，我们对制何首乌进行了系统的化学成分研究并对炮制前后何首乌的HPLC图谱进行了比较分析。运用溶剂萃取，各种柱层析及重结晶等方法，从制何首乌乙醇提取物中共分离得到35个单体化合物，并综合运用物理化学方法，特别是现代波谱学技术，包括一维和二维核磁共振、圆二色谱、高分辨质谱等，鉴定了其中29个化合物的化学结构，分别为：-羟基大黄素（PMPE-1）、芦荟大黄素（PMPE-2）、邻苯三酚（PMPE-3）、胡萝卜苷（PMPE-4）、大黄素-8-O--D-葡萄吡喃糖苷（PMPE-5）、2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O--D-葡萄吡喃糖苷（PMPE-6）、儿茶素（PMPE-7）、2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O--D-（6’’-乙酰基）-葡萄吡喃糖苷（PMPE-8）、2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O--D-（2’’-没食子酰基）-葡萄吡喃糖苷（PMPE-9）、没食子酸（PMPE-10）、穆坪马兜铃酰胺（PMPE-11）、polygonumoside A（PMPB30-1）、何首乌乙素（PMPB30-2）、Polygonumoside D（PMPB30-3）、Polygonumoside C（PMPB30-4）、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O--D-6’’-（-D-葡萄吡喃糖基）-葡萄吡喃糖苷（PMPB30-7）、何首乌丙素（PMPB30-8）、Polygonumoside B （PMPB30-11）、大黄素甲醚-8-O--D-葡萄吡喃糖苷（PMPB30-12）、苜蓿素-7-O--D-葡萄吡喃糖苷（PMPB30-13）、正丁基果糖苷（PMPB30-14）、表儿茶素（PMPB30-16）、2-（2-羟丙基）-5-甲基色原酮-7-O--D-葡萄吡喃糖苷（PMPB30-18）、南烛木树脂酚-3-O--D-葡萄吡喃糖苷（PMPB30-19）、Polygonumoside E（PMPB30-20）、大黄素甲醚（PMPC-1）、大黄素（PMPC-2）、2,5-二甲基-7-羟基色原酮（PMPC-3）、谷甾醇（PMPP-1）。以上化合物中，PMPB30-1、PMPB30-3、PMPB30-4、PMPB30-11、PMPB30-20这五个化合物为新化合物，其中PMPB30-1与PMPB30-11为一对非对映异构体，拥有一个新的2H-苯并[c]呋喃[2,3-f]色原-7(3H)-酮的母核骨架；PMPB30-3与PMPB30-4也是一对非对映异构体，是首次从何首乌中分离得到的二苯乙烯二聚体。PMPC-3、PMPE-3、PMPB30-13、PMPB30-18这四个化合物为首次从何首乌中分离得到。其中PMPB30-20、PMPC-3和PMPB30-18是首次从何首乌中分离得到的色原酮类化合物。经对比炮制前后何首乌HPLC图谱，我们发现，何首乌经黑豆汁法炮制后，二苯乙烯苷PMPE-6（2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O--D-葡萄吡喃糖苷）含量有所下降，而其他二苯乙烯类化合物PMPE-8、PMPE-9和PMPE30-8以及新化合物polygonumosides A-D的含量均有所升高，以PMPE-8、PMPE-9含量升高较为明显，说明在炮制过程中，二苯乙烯苷PMPE-6发生了化学变化，如在葡萄糖上发生了乙酰化或没食子酰化；蒽醌类化合物PMPC-2与PMPE-1含量有所升高，而PMPC-1含量有所下降，但游离型蒽醌总含量有所升高，结合型蒽醌PMPE-5的含量远低于其苷元PMPC-2且在炮制后含量降低，表明炮制后结合型蒽醌会转化为游离蒽醌。我们对分离得到的部分化合物进行了植物雌激素活性筛选和体外抗氧化活性筛选，结果显示PMPE-7（10-5M）可激动ER和ER转录活性，对受体亚型无明显选择性；蒽醌类化合物PMPC-2，PMPE-1，PMPE-2，PMPE-5，均在高浓度10-6M才表现出明显的激活受体转录活性，且无受体选择性；二苯乙烯苷PMPE-6在10-7~10-4mol/L浓度下能分别激活雌激素及受体，并呈现出剂量依赖性，且对受体的激活强于，但均弱于阳性对照雌二醇。以上各化合物对雌激素受体激活作用均能被雌激素受体拮抗剂所拮抗。PMPC-1对雌激素受体无激活作用。化合物polygonumoside A和polygonumoside B具有较强的抗氧化活性，而polygonumoside C和polygonumoside D抗氧化活性很弱。本文还对近年来国内外何首乌化学成分、炮制及药理活性的研究进展进行了综述。