【摘 要】
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目的探讨核受体法尼醇X受体(Farnesoid X Receptor,FXR)是否通过Wnt/β-Catenin信号通路调控肝癌细胞的生物学功能。方法1.利用Agilent技术分析SK-Hep-1-FXR(FXR过表达)和SK-
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目的探讨核受体法尼醇X受体(Farnesoid X Receptor,FXR)是否通过Wnt/β-Catenin信号通路调控肝癌细胞的生物学功能。方法1.利用Agilent技术分析SK-Hep-1-FXR(FXR过表达)和SK-Hep-1-NC(对照)两组细胞中基因表达谱芯片检测结果。采用GO(Gene Ontology)功能分析筛选出与两组细胞之间差异表达基因相关的生物学过程,并通过Pathway分析筛选出显著富集两组细胞差异表达基因的信号通路。2.根据基因表达谱芯片分析结果,选择与肝癌细胞增殖和转移关系密切的Wnt/β-Catenin信号通路进行进一步验证。3.采用Real-time-PCR和Western blot检测SK-Hep-1-FXR和SK-Hep-1-NC,以及Huh7-si FXR(FXR表达下调)和Huh7-NC(对照)两对细胞中,FXR在不同表达水平下,激活剂GW4064将FXR的功能激活后β-Catenin的表达及核转位的情况。结果1.GO分析和Pathway分析结果显示:SK-Hep-1细胞中FXR表达上调后,与增殖和转移关系密切的Wnt/β-Catenin信号通路中显著富集了与对照组表达差异的基因。其中Wnt5A、FZD5、LRP5和β-Catenin表达下调,DVL1和SFRP1表达上调(p<0.05)。同时,β-Catenin靶基因Cyclin D1、c-myc、c-jun、MMP9的m RNA表达下调(p<0.05)。2.Real-time-PCR和Western blot结果表明,与对照组相比,SK-Hep-1-FXR中,β-Catenin表达下调,核转位明显减少(p<0.05)。相反,在Huh7-si FXR中,与对照组相比,β-Catenin表达上调,核转位显著增多(p<0.05)。结论FXR可能通过Wnt/β-Catenin信号通路来调控肝癌细胞的生物学功能。
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