妊娠期疾病对子代心血管系统的影响及其机制研究

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第一部分卵巢过度刺激综合症对子代心血管系统的影响:队列研究目的:评估母体卵巢过度刺激综合症(OHSS)对子代心血管系统功能的影响。材料和方法:队列研究共纳入42名OHSS患者的子代,34名非OHSS-体外受精(IVF)获得的子代,48名自然妊娠获得的子代。三组受试者间分娩孕周与出生体重相匹配。采用多普勒超声评价其心脏功能与血管功能。结果:与非OHSS-IVF组以及自然妊娠组相比,OHSS组子代表现出较低的二尖瓣E/A比值,血流介导的舒张功能受损。而射血分数、颈总动脉内膜中层厚度、血管僵硬度指标等三组间无明显差异。OHSS组孕妇孕早期血清中及分娩时脐带血中雌二醇的浓度比其他两组均显著升高。结论:卵巢过度刺激综合症患者所生子代存在心血管功能异常,主要表现为心脏舒张功能与血管内皮功能受损。孕期特别是孕早期的高雌二醇水平可能是造成子代出生后心血管功能异常的原因。第二部分:卵巢过度刺激综合症子代脐动脉组织蛋白质组学研究目的:探究造成卵巢过度刺激综合症(OHSS)子代心血管功能异常的蛋白水平分子机制。材料与方法:收集重度OHSS的孕妇以及自然妊娠孕妇分娩时的脐带。选取其中3例OHSS组与对照组进行基于iTRAQ的蛋白质组学研究,并用Western blot方法验证结果,用Ingenuity Pathways Analysis软件包进行生物信息学分析。结果:共鉴定得1640种蛋白质,其中40种在OHSS组与自然妊娠组之间表达存在差异。Western blot验证差异蛋白中GPX1与SOD3的表达差异确实存在。生物信息学分析显示糖代谢通路与氧化应激相关代谢通路发生改变,雌二醇与孕酮可能是造成蛋白质表达变化的上游调节因子。结论:蛋白质组学分析显示OHSS组脐动脉出现蛋白质表达谱改变,其中糖代谢通路与氧化应激代谢通路相关蛋白差异最为显著。孕期高雌二醇与孕酮水平可能是造成蛋白差异表达的原因。第三部分:子痫前期子代盐皮质激素受体异常剪接对血压调节的影响及其机制目的:探究子痫前期子代盐皮质激素受体(Mineralocorticoid Receptor,MR)的异常剪接对血压调节造成的影响,并研究其影响机制。材料与方法:收集子痫前期(实验组)与正常妊娠(对照组)孕妇脐静脉组织,检测其MR的异常剪接情况,检测MR下游基因SCNN1A表达情况。构建第五外显子缺失型MR(DelE5型MR)与野生型MR质粒。在成功转染入hela细胞后,再加入不同配体(醛固酮、可的松、孕酮、11-脱氢皮质酮)等情况下,评估下游SCNN1A基因的表达情况。结果:子痫前期组脐静脉中DelE5型MR与SCNN1A表达均上升,且DelE5型MR与SCNN1A表达量呈正相关。蛋白质3D构象预测提示Del E5型MR与配体结合可能出现异常。细胞试验中,可的松异常显著激活Del E5型MR,上调SCNN1A,同时可的松几乎不激活野生型MR。孕酮、11-脱氢皮质酮均不能激活Del E5型MR与野生型MR。结论:子痫前期子代DelE5型MR以及SCNN1A表达量升高。可的松通过异常激活Del E5型MR造成SCNN1A表达量上升,最终导致子痫前期子代患高血压病风险升高。
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