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本学位论文得到陕西省教育厅专项科研计划项目“通利枢机针刺法干预Notch信号通路调控大鼠脑缺血后神经干细胞再生的研究”(项目编号:14JK1211)和陕西省科学技术厅自然科学技术研究计划青年人才项目“利枢针刺法干预Notch信号通路调控大鼠脑缺血后神经干细胞再生的研究”(项目编号:2016JQ8020)的资助。
目的:
探讨通利枢机针刺法对右大脑中动脉永久性缺血模型大鼠行为学、脑梗死体积百分比、缺血侧脑半球海马组织Jagged2和Notch2蛋白表达的影响。
方法:
将68只成年雄性Sprague-Dawley大鼠经过造模和假手术处理,造模成功的40只大鼠随机分到阳性药物组、普通针刺组、通利枢机针刺组、模型对照组(每组n=10);将假手术处理的10只大鼠归到假手术组。辐照灭菌型饲料喂养1周后,除假手术组外的其余4组用线栓法建立右大脑中动脉永久性缺血模型。①假手术组和模型对照组:术后每日抓拿1次,常规消毒左侧正营、天井、环跳穴;②阳性药物组:用0.9%生理盐水将胞二磷胆碱0.4mg/kg稀释至2ml,术后每天灌胃;③普通针刺组:术后第1天行针刺治疗,日行一次,选取百会、大椎,穴位定位参照《实验针灸学》、《实验动物针灸穴位图谱》并结合人体同身寸取穴法,留针时间为15分钟,留针期间每间隔5分钟,施平补平泻手法1次;④通利枢机组:术后第1天选取左侧正营、天井、环跳,穴位定位参照《实验针灸学》、《实验动物针灸穴位图谱》并结合人体同身寸取穴法,留针时间为15分钟,留针期间每间隔5分钟,施平补平泻手法1次,日行一次。各组大鼠连续治疗28天。术后第1、7、14、21、28天对神经功能进行评分,全部治疗结束后检测脑梗死体积百分比,以及蛋白质免疫印迹法检测大鼠右侧脑半球海马组织Jagged2和Notch2蛋白的表达。
结果:
1.针刺治疗右大脑中动脉永久性缺血模型大鼠,可以降低神经功能缺损评分,对肢体运动功能有所改善,运用通利枢机针刺方法效果显著,在术后第21天治疗效果最明显;
2.通利枢机针刺法能够显著改善脑梗死体积百分比;
3.通利枢机针刺法改善缺血性脑血管疾病症状的作用机制可能与Notch信号通路的激活有关,此针法能够上调Jagged2和Notch2蛋白的表达,发挥了神经保护的作用,减轻了大鼠脑缺血进一步损伤。
结论:
针刺可以改善右大脑中动脉永久性缺血模型大鼠的神经功能缺损的行为学表现,通利枢机针刺法对大鼠缺血侧大脑海马组织Jagged2和Notch2蛋白有明显上调作用,基于“少阳主枢”“少阳枢机不利”理论指导下的通利枢机针刺法治疗缺血性脑血管病在临床上具有重要意义。
目的:
探讨通利枢机针刺法对右大脑中动脉永久性缺血模型大鼠行为学、脑梗死体积百分比、缺血侧脑半球海马组织Jagged2和Notch2蛋白表达的影响。
方法:
将68只成年雄性Sprague-Dawley大鼠经过造模和假手术处理,造模成功的40只大鼠随机分到阳性药物组、普通针刺组、通利枢机针刺组、模型对照组(每组n=10);将假手术处理的10只大鼠归到假手术组。辐照灭菌型饲料喂养1周后,除假手术组外的其余4组用线栓法建立右大脑中动脉永久性缺血模型。①假手术组和模型对照组:术后每日抓拿1次,常规消毒左侧正营、天井、环跳穴;②阳性药物组:用0.9%生理盐水将胞二磷胆碱0.4mg/kg稀释至2ml,术后每天灌胃;③普通针刺组:术后第1天行针刺治疗,日行一次,选取百会、大椎,穴位定位参照《实验针灸学》、《实验动物针灸穴位图谱》并结合人体同身寸取穴法,留针时间为15分钟,留针期间每间隔5分钟,施平补平泻手法1次;④通利枢机组:术后第1天选取左侧正营、天井、环跳,穴位定位参照《实验针灸学》、《实验动物针灸穴位图谱》并结合人体同身寸取穴法,留针时间为15分钟,留针期间每间隔5分钟,施平补平泻手法1次,日行一次。各组大鼠连续治疗28天。术后第1、7、14、21、28天对神经功能进行评分,全部治疗结束后检测脑梗死体积百分比,以及蛋白质免疫印迹法检测大鼠右侧脑半球海马组织Jagged2和Notch2蛋白的表达。
结果:
1.针刺治疗右大脑中动脉永久性缺血模型大鼠,可以降低神经功能缺损评分,对肢体运动功能有所改善,运用通利枢机针刺方法效果显著,在术后第21天治疗效果最明显;
2.通利枢机针刺法能够显著改善脑梗死体积百分比;
3.通利枢机针刺法改善缺血性脑血管疾病症状的作用机制可能与Notch信号通路的激活有关,此针法能够上调Jagged2和Notch2蛋白的表达,发挥了神经保护的作用,减轻了大鼠脑缺血进一步损伤。
结论:
针刺可以改善右大脑中动脉永久性缺血模型大鼠的神经功能缺损的行为学表现,通利枢机针刺法对大鼠缺血侧大脑海马组织Jagged2和Notch2蛋白有明显上调作用,基于“少阳主枢”“少阳枢机不利”理论指导下的通利枢机针刺法治疗缺血性脑血管病在临床上具有重要意义。