【摘 要】
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前言:肿瘤免疫治疗是目前肿瘤临床治疗的重要发展趋势。抗肿瘤免疫应答中关键的一步是抗原递呈细胞(APC)将肿瘤抗原递呈给T细胞,激活机体的免疫系统来清除肿瘤细胞。树突状细胞(DC
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前言:肿瘤免疫治疗是目前肿瘤临床治疗的重要发展趋势。抗肿瘤免疫应答中关键的一步是抗原递呈细胞(APC)将肿瘤抗原递呈给T细胞,激活机体的免疫系统来清除肿瘤细胞。树突状细胞(DC)是目前认为功能最强的抗原递呈细胞,也是APC的一个独特的亚群。它能专用新抗原和记忆抗原去致敏记忆性B细胞和T细胞,活化静息的幼稚T细胞,这些特征使DC可作为癌特异性疫苗的天然佐剂而起作用,该类疫苗已应用于某些肿瘤治疗的研究。热休克(HS)处理的肿瘤细胞可产生高水平的诱导性热休克蛋白(HSP),肿瘤源性HSP可能是有效的免疫原,能诱导机体产生特异性抗肿瘤免疫应答。DC细胞是机体最强的抗原提呈细胞,其具有HSP70高亲和力受体CD91,最近研究提示,来自肿瘤的HSP可诱导DC成熟,DC捕获肿瘤抗原后,可能作为特异性瘤苗用于肿瘤免疫治疗。 目的:本课题采用热休克修饰宫颈癌U14细胞抗原冲击的树突状细胞,研究观察能否诱导特异性细胞毒T细胞的生成。 方法:本课题采用反复冻融法提取HS处理的U14细胞抗原,用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)诱导同基因小鼠骨髓干细胞分化为DC,通过形态学观察和刺激初始T细胞活化增殖来进行鉴定。将HS修饰的U14抗原体外冲击DC,制得DC疫苗;将致敏DC和胸腺淋巴细胞共育获得致敏淋巴细胞;将致敏淋巴细胞与宫颈癌U14细胞共育,观察负载抗原DC体外诱导的淋巴细胞对靶细胞的杀伤作用。 结果:实验研究发现:(1)用细胞因子从小鼠骨髓细胞诱生出DC细胞,形态和功能鉴定证明为成熟DC。(2)经热休克修饰的U14抗原(HS-U14-Ag)冲
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