山栀子中栀子苷、栀子黄色素的分离、纯化及栀子苷的结构鉴定

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栀子(Gardenia)果实是一味临床常用的中药,主治肝硬化、痢疾,具有消炎利胆、利尿等功效。栀子苷(Geniposide)是栀子果实中主要有效成分之一,而栀子黄色素常被用作天然的食品着色剂。本论文旨在以栀子果实为原料,利用大孔吸附树脂法分离得到栀子苷和栀子黄色素,再用硅胶柱层析法纯化栀子苷部分,最终得到纯度为95.1%的栀子苷产品。主要实验内容如下:1测定了栀子果实的主要化学成分;建立薄层层析-紫外分光光度法测定栀子苷,该法操作简便,经济易行,结果较为准确,可用于指导栀子苷浸提工艺参数的筛选。2以栀子苷、栀子黄色素为提取指标,通过单因素实验和正交实验,得到山栀子果实中栀子苷的最佳提取工艺条件:乙醇浓度60%(质量分数,下同),料液比1∶2 5,浸提温度20℃,浸提时间1小时;栀子黄色素的最佳提取工艺条件:乙醇浓度60%,料液比1∶20,浸提温度40℃,浸提时间1小时。3通过对5种大孔树脂的静态吸附研究,得出X-5型大孔吸附树脂是一种比较理想的树脂,吸附量大,解吸率高,适合于栀子苷、栀子黄色素的初步分离。研究也表明温度对X-5的吸附性能影响极小。通过对X-5型大孔吸附树脂动态洗脱研究,得出以下结论:先用2~3BV蒸馏水充分洗涤以除去糖类、氨基酸等强极性物质,再用0.9BV、质量分数为20%~35%乙醇溶液可以将栀子苷比较集中的洗脱下来,而栀子黄色素基本不被洗脱下来;当乙醇溶液浓度大于40%时,栀子黄色素大部分被洗脱下来。4通过硅胶柱层析研究,得出硅胶柱层析法能较好的纯化栀子苷,其中采用氯仿-甲醇洗脱剂所得到的栀子苷产品纯度达到92.3%,得率80.3%,采用乙酸乙酯-甲醇洗脱剂所得到栀子苷产品纯度89.1%,得率79.3%。5对栀子苷标准品、栀子苷产品A4分别进行薄层层析法定性实验、HPLC-ESI-MS联用实验、FT-IR傅立叶变换红外光谱实验,可以判定A4确实是栀子苷。
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