离子诱变选育纤溶酶(Plasmin)高产菌以及部分酶学性质研究

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发酵液通过硫酸铵分级盐析沉淀,CM-Sephadex C-25阳离子交换层析,DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤,获得一种具有纤溶酶活性的蛋白酶BK,其分子量大约为23KD.以苯胺-硫酸法测定中性糖含量为7.55﹪,以3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测总还原糖含量分别为7.45﹪.以硅胶G薄层层析法鉴定糖的种类,该酶所含糖蛋白主要为中性戊糖,同时研究了一些金属离子的添加对纤溶酶的活性的影响,EDTA对酶活影响不大,而PMSF对酶活有较强的抑制作用,说明该酶的活性中心有丝氨酸参与,属丝氨酸酶系,而其作用中心无Ca<2+>,Mg<2+>等金属离子参与.脲和SDS变性剂对酶有一定的抑制作用,但较弱,可以看出酶的抗变性剂能力较强.
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