土壤盐害影响了世界上约四分之三的土地，直接导致了农作物减产，影响民生。盐害产生两种胁迫，渗透胁迫和离子胁迫。钙信号作为第二信使，在响应植物应对盐胁迫的途径中起到了至关重要的作用。它能够调节下游基因的表达来应对胁迫。　　本实验利用水母荧光蛋白与钙离子结合后会产生荧光的现象，通过 Aequorin蛋白在拟南芥中稳定表达的株系AQ作为材料，构建T-DNA插入的突变体库，用氯化钠这一最具代表性的盐作为胁迫条件，筛选对于盐胁迫不敏感，在胁迫条件下不能导致细胞内钙离子浓度升高的拟南芥突变体。得到以下结果：　　（1）利用已构建好的199个T-DNA插入突变体库，每个库选取500~600粒种子进行无菌培养。在幼苗长出两片真叶的时候进行盐处理，并利用Aequorin荧光成像技术拍照记录拟南芥幼苗在盐胁迫处理下的荧光成像情况，挑选出不能发出荧光或者荧光较弱的候选突变体。每个突变体库挑选约40株幼苗进行培养，得到F2代种子。总共筛选出约8000个候选突变体。　　（2）取8000个候选突变体F2代种子20~30粒，点成线状放在无菌培养基中，培养至幼苗长出两片真叶。利用荧光成像技术对突变体进行验证。最终从8000个候选突变体中，得到16个适合的突变体。　　（3）用这16个候选突变体的F3代种子选取4~5粒，培养F3代，单株收种，进行平行实验。利用荧光成像技术，确定该突变体的性状的稳定性。选取稳定株系进行下一步实验。　　（4）选取其中的sim2（salt-stress insensitive mutant2）突变体进行初步分析。利用Adapter Ligation技术克隆到sim2基因，通过半定量的方法确定了sim2基因在突变体内不表达。利用该基因构建超表达载体；构建GFP载体进行亚细胞定位；用sim2基因的启动子构建Promoter接GUS载体来研究基因的组织特异性表达；构建 Promoter接 sim2基因全长载体，以进行互补实验。并利用拟南芥花浸法转基因，已得到F3代拟南芥转基因种子。　　（5）将sim2突变体与对照（AQ）及购买的同基因不同位点突变株系（order）进行生理实验比较分析。发现在盐胁迫下，sim2突变体生长状况与对照类似；在干旱胁迫下sim2突变体生长状况弱于AQ。说明sim2突变体对于盐胁迫引发的渗透胁迫不敏感，不能使细胞内的钙浓度上升，无法引起下游的钙信号转导及调控下游基因表达。使植物无法应对盐胁迫而生长势减弱。　　（6）将三个株系放于含 H2O2培养基中进行实验。三个株系生长状况类似，但sim2突变体表现出抗H2O2的表型，衰老速度缓于其他两个株系。　　（7）sim2基因在根、叶片、花丝、花萼中都表达较高，而在果荚、花瓣、花药和茎中却较低。　　经过本实验研究，我们在拟南芥抵抗盐胁迫，导致的钙离子信号转导上有了初步的探究。