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第一部分B7-H1在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及与相关T细胞和DC的浸润关系目的：检测弥漫大B细胞淋巴瘤中B7-H1的表达水平。方法：收集弥漫大B细胞淋巴瘤患者手术切除的瘤标本54例(其中IPI<2分的31例,IPI>2分的23例),瘤周正常淋巴组织14例,再通过下面方法进行分析：1.通过Western Blot来分析B7-H1在弥漫大B细胞淋巴瘤和正常淋巴组织中的表达水平。2.通过流式细胞仪对比分析弥漫大B细胞淋巴瘤组织和正常淋巴组织中,HLA-DR+CD14+巨噬细胞表达B7-H1的水平及下列细胞的比例：CD4+/CD8+T细胞、HLA-DR+CD11c+Lineage-髓样树突状细胞(Myeloid DC,mDC)和HLA-DR+CD123+Lineage浆细胞样树突状细胞(Plasmacytoid DC, pDC), CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Treg, Treg)。结果：1. Western Blot显示弥漫大B细胞淋巴瘤组织和正常淋巴组织均可检测到B7-H1的表达,且淋巴瘤组织比正常淋巴组织表达更高水平的B7-H1。2.流式细胞分析显示：1)HLA-DR+CD14+巨噬细胞在弥漫大B细胞淋巴瘤组织中表达B7-H1的水平明显高于正常淋巴组织：HLA-DR+CD14+巨噬细胞在正常淋巴组织中表达B7-H1的比例为(8.36±0.52)%,IPI<2分的DLBCL中表达B7-H1的比例为(12.85±0.82)%,IPI>2分的DLBCL中表达B7-H1的比例为(30.57±0.76)%；且在IPI<2分和IPI>2分的DLBCL中表达B7-H1的比例均明显高于正常淋巴组织,P<0.05,在IPI>2分的DLBCL中B7-H1的比例明显高于IPI<2分的,P<0.01。2) Treg、CD4+T/CD8+T比值和pDC在弥漫大B细胞淋巴瘤组织中的比例要明显高于正常淋巴组织,且在两组织中的差异有统计学意义：Treg:在正常淋巴组织中的比例为(1.58±0.14)%,IPI<2分的DLBCL中的比例为(4.68±0.30)%,IPI>2分的DLBCL中的比例为(5.55±0.50)%；且在IPI<2分开IPI>2分的DLBCL中的比例均明显高于正常淋巴组织,P<0.01,在IPI<2分和IPI>2分的DLBCL中的比例差异无统计学意义,P>0.05。说明DLBCL比正常淋巴组织浸润更高比例的Treg。CD4+T/CD8+T比值：正常淋巴组织中CD4+T/CD8+T的比例为(0.44±0.03)%,IPI<2分的DLBCL中CD4+T/CD8+T的比例为(1.04±0.56)%,IPI>2分的DLBCL中CD4+T/CD8+T的比例为(1.78±0.06)%；IPI<2分和IPI>2分的DLBCL中CD4+T/CD8+T的比例均明显高于正常淋巴组织,P<0.01; IPI>2分的DLBCL中CD4+T/CD8+T的比例明显高于IPI<2分的,P<0.01。说明DLBCL中CD4+T/CD8+T的比值上调。mDC：正常淋巴组织中mDC的比例为(57.00±1.53)%,IPI<2分的DLBCL中mDC的比例为(65.49+2.16)%,IPI>2分的DLBCL中mDC的比例为(60.60±1.05)%；IPI<2分、IPI>2分的DLBCL和正常淋巴组织中mDC之间的比例差异均无统计学意义,P>0.05；pDC：正常淋巴组织中pDC的比例为(64.54+1.97)%,IPI<2分的DLBCL中pDC的比例为(86.66±1.75)%,IPI>2分的DLBCL中pDC的比例为(87.334±1.45)%；IPI<2分和IPI>2分的DLBCL中pDC的比例均明显高于正常淋巴组织,P<0.01；IPI<2分和IPI>2分的DLBCL中pDC的比例差异无统计学意义,P>0.05。说明DLBCL比正常淋巴组织浸润更高比例的pDC。结论：与正常淋巴组织相比,DLBCL微环境中CD4+T/CD8+T比值、Treg比例、pDC比例和B7-H1比例同时显著增高,提示它们之间有一定的关联,也预示着DLBCL微环境中细胞免疫的失衡可能与淋巴瘤的免疫逃逸有关。第二部分PD-1在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达和对T细胞功能的影响目的：研究PD-1在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达水平和其对T细胞分泌细胞因子功能的影响。方法：收集弥漫大B细胞淋巴瘤患者手术切除的瘤标本54例(其中IPI<2分的31例,IPI>2分的23例),瘤周正常淋巴组织14例,再通过下面方法进行分析：1.通过Western Blot技术分析弥漫大B细胞淋巴瘤组织和正常淋巴组织中PD-1的表达水平；2.利用流式细胞仪对比分析两组织中CD8+T的PD-1的表达水平及CD8+T细胞分泌双阳性IFN-γ/IL-2的水平。结果：1.Western Blot显示弥漫大B细胞淋巴瘤组织及正常淋巴组织均表达PD-1,且瘤组织比正常淋巴组织表达更高水平的PD-1；2.流式细胞分析显示：1)PD-1+CD8+T细胞在IPI<2分的DLBCL组织中的比例(12.23±0.85)%高于正常淋巴组织(3.91±0.41)%,P<0.01；IPI>2分的DLBCL组织中PD-1+CD8+T细胞比例(31.794±0.87)%高于IPI<2分的瘤组织(12.23±0.85)%,P<0.01。2)细胞因子IFN-γ/IL-2双阳性的表达：在正常淋巴组织中PD-1+CD8+T细胞是(79.56±3.08)%,在PD-1-CD8+T细胞是(88.22±1.8)%,两者无差异,P>0.05；在IPI<2分的DLBCL组织中PD-1+CD8+T细胞(35.16±1.23)%较PD-1-CD8+T细胞(67.68±1.74)%表达较少的双阳性IFN-γ/IL-2, P<0.01;在IPI>2分的DLBCL组织中PD-1+CD8+T细胞(11.78±1.57)%较PD-1-CD8+T细胞(59.454±1.43)%表达较少的双阳性IFN-γ/IL-2, P<0.01,且PD-1+CD8+T细胞在IPI>2分的DLBCL组织中比在IPI<2分的DLBCL组织中分泌更少的双阳性IFN-γ/IL-2, P<0.01。结论：弥漫大B细胞淋巴瘤组织中CD8+T细胞的PD-1表达增加,而分泌抗肿瘤的细胞因子减少,说明PD-1在CD8+T细胞上的高表达影响其抗肿瘤能力。