桦褐孔菌多糖降尿酸作用的评价及固体饮料的制备

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高尿酸血症(Hyperuricemia,HUA)主要表现为人体内尿酸(Uric Acid,UA)水平过高,其主要原因是人体内嘌呤代谢和调节机制产生异常,随之出现嘌呤代谢紊乱造成代谢过程的终产物尿酸出现排泄障碍。当人体尿酸长期处于过高水平时,就会引发痛风(Gout)。目前,临床上使用的治疗药物(例如别嘌醇和非布索坦)是非常有效的黄嘌呤氧化酶抑制剂,但是这些药物存在许多副作用,对器官造成损伤导致以及多种疾病,甚至出现了死亡的报道。因此许多学者正在研究来源天然产物的黄嘌呤氧化酶抑制剂,以期安全性高、低毒性或无毒副作用的天然产物活性成分成为营养干预高尿酸血症的有效方法。本文在实验室前期已有的桦褐孔菌多糖提取物的基础上,研究桦褐孔菌粗多糖及其3个分级醇沉组分(IOP40、IOP60和IOP80)对XO的体外抑制作用,筛选出抑制活性最强组分,并进一步探究其对XO的抑制机理和抑制类型;通过对小鼠连续7天灌胃氧嗪酸钾诱导构建小鼠高尿酸血症模型,探究桦褐孔菌多糖对高尿酸血症小鼠体内的尿酸水平、脏器功能损伤以及氧化应激反应的影响,并对小鼠肾脏组织学形态进行观察,探究桦褐孔菌多糖在动物体内是否具有肾脏保护作用;通过单因素试验和正交试验研究了桦褐孔菌多糖复合固体饮料的基本配方,通过单因素实验筛选出使固体饮料具有最佳稳定状态的稳定剂,得到最佳稳定剂的最适添加量,为了防止固体粉末吸水结块,通过单因素实验确定抗结剂发挥作用的最佳添加量。主要研究结论如下:(1)通过桦褐孔菌粗多糖及其分级醇沉多糖对于XO的体外酶抑制实验研究,4个样品对XO的活性均有一定的抑制作用,且通过IC50值的计算筛选出了对于XO抑制作用最强的多糖组分为IOP40和IOP60,其IC50值分别为0.324±0.02 mg/m L和0.386±0.01 mg/m L;进一步探究IOP40和IOP60对XO的抑制可逆性作用和抑制类型,结果表明其均为有效的可逆性XO抑制剂,抑制类型为混合型抑制。(2)通过对高尿酸血症小鼠灌胃不同剂量的桦褐孔菌醇沉多糖组分IOP60,实验结果表明:IOP60具有降低小鼠体内尿酸水平的能力,还能一定程度地降低小鼠血清中的BUN和Cr的含量;进一步对小鼠肾脏组织形态观察发现,在IOP60的作用下肾脏病变情况有所缓解,说明IOP60对肾脏能够起到一定的保护效果,可以明显缓解高水平尿酸给肾脏带来的损伤作用;根据各组小鼠体内的SOD、CAT的活性以及MDA、GSH含量的测定,结果发现高剂量的IOP60能够有效提高SOD及CAT活性,对GSH及MDA水平具有一定的调节作用,证明IOP60具有较强的抗氧化能力,从而减少体内氧化应激损伤的发生。(3)通过对桦褐孔菌复合固体饮料风味的研究,将桦褐孔菌提取物和白砂糖、植脂末等配料复配制成一款新型的植物固体饮料,确定最优配方为白砂糖添加量50%、植脂末添加量26%、咖啡粉添加量1.5%、绿茶粉添加量1.5%,桦褐孔菌提取物添加量为9%,杏仁粉添加量为10%,根据此配方冲调的饮料口感最佳。通过单因素试验确定β-环糊精作为该固体饮料的稳定剂,添加量为0.20%,抗结剂二氧化硅的最适添加量为0.12 g/10 g,并在此基础上建立桦褐孔菌复合固体饮料的产品标准。
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