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为了研究河北省秦皇岛地区狐大肠杆菌肺炎的流行情况,以及本地区大肠杆菌的耐药趋势,本试验采用实验室常规方法分离细菌,并通过玻片凝集、PCR技术及药敏试验对本地区血清型、毒力基因及耐谱和耐药基因进行检测,为本地区大肠杆菌肺炎的流行和致病菌临床治疗用药提供数据支撑。研究内容以及结果如下:1.病料采集及细菌鉴定:在河北秦皇岛地区各养殖场中采集病死狐的肺脏、肝脏和鼻拭子等共450份,通过鉴别培养、生化鉴定、16SrRNA序列分析等方法进行鉴定,分离出105株肺炎大肠杆菌,致病性试验结果显示,其中77株具有致病性。2.毒力基因及血清型检测:对分离的致病菌株进行毒力基因和血清型检测。检测19种毒力基因,分离菌株携带14种不同毒力基因,其中irp2检出率高达98.7%,fyuA、papC、fimC、iucDa、colv检出率也较高,在50.6%～85.7%之间,携带率较低的在1.3%～5.2%之间。其余未检出。检测出分离菌株携带9种血清型,O1、O8、O78、O12四种血清型是本地区的优势血清型。3.耐药表型检测:采用K-B药敏纸片法,用23种抗生素对分离的致病性菌株进行药敏试验,结果77株全部出现耐药现象。其中对SMZ耐药率100%,对P、AM、OT等9种药物耐药率很高,均达到95%以上,对DOX、FFC、STR的耐药率在72%～88%之间,对ENR、AMK、CIP等耐药情况在42%～70%之间,耐药率较低的也达到30%以上。所有菌株均有交叉耐药现象,耐药谱型高达23种,交叉耐药现象严重。4.耐药基因检测:通过PCR方法对分离菌株进行耐药基因检测,结果共检测出携带18种耐药基因,结果表明分离菌株以携带氟喹诺酮类药物耐药基因parE、parC、gyrB、gyrA几种耐药基因为主,占氟喹诺酮类药物耐药菌株的92%以上,其次oqxA、oqxB基因,也占到此类药物耐药菌株的比例分别是62.3%和66%,少数菌株携带qepA基因7.5%和qnrS基因1.9%,而且部分菌株同时携带多种类型耐药基因。本地区大肠杆菌耐药基因携带情况很严重。