【摘 要】
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目的:研究冬凌草甲素对人肝癌HepG2细胞增殖和自噬诱导的影响,并初步探讨其增殖和自噬诱导的作用机制。 方法:以体外培养的肝癌HepG2细胞分别加入浓度为3、6.25、12.5、25
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目的:研究冬凌草甲素对人肝癌HepG2细胞增殖和自噬诱导的影响,并初步探讨其增殖和自噬诱导的作用机制。 方法:以体外培养的肝癌HepG2细胞分别加入浓度为3、6.25、12.5、25、50umol/L的冬凌草甲素,其中0umol/L冬凌草甲素作为空白组,药物作用24h、48h、72h后,采用MTT法检测细胞增殖率;用相差显微镜观察不同药物浓度及不同时间段的肝癌细胞形态学的影响;应用MDC染色法,荧光显微镜下观察自噬泡的情况;应用RT-PCR法检测肝癌细胞HepG2的beclin1 mRNA表达情况;利用Western blot法检测beclin1基因蛋白的表达情况。 结果:1.MTT结果显示冬凌草甲素可以抑制肝癌细胞增殖,且存在浓度和时间依赖关系,以冬凌草甲素50umol/l、72h最明显,抑制率为81.6%;2. MDC染色法显示,HepG2细胞经冬凌草甲素50umol/l作用72h后自噬泡较空白组明显增多;3. RT-PCR及Western Blot结果显示,beclin1mRNA和蛋白的表达随药物浓度的增加呈递增的趋势,存在时间及浓度依赖性,与空白组比较差异有统计学意义。 结论:冬凌草甲素可抑制人肝癌 HepG2细胞增殖并诱导其自噬,上调 beclin1mRNA和蛋白的表达,且存在时间及浓度依赖关系。
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