缺氧诱导的上皮—间质转化与肝癌细胞侵袭力的关系研究

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目的:探讨肝癌细胞中是否存在由缺氧引发的上皮-间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT),以及由此引起的肝癌细胞迁移及侵袭力改变,为肝癌的治疗提供新的思路。方法:选取两种具有不同转移能力的肝癌细胞,通过缺氧培养建立人肝癌细胞物理缺氧模型,倒置显微镜观测肝癌细胞在缺氧条件下的形态改变,应用Western Blot方法检测上皮细胞标志蛋白E-Cadherin和间质细胞标志蛋白Vimentin的表达变化,图像分析软件检测其蛋白灰度值及蛋白相对值,用Transwell小室检测缺氧后肝癌细胞的迁移、侵袭能力。结果:倒置显微镜下观察,缺氧后的细胞由原来的紧密排列状态转变为较松散的纺锤体样改变,细胞松散。Western blot检测显示,上皮细胞标志蛋白E-Cadherin表达值较正常明显下降(P<0.01),间质细胞标志蛋白Vimentin表达值明显升高(P<0.01)。Transwell迁移及侵袭实验显示,肝癌细胞缺氧后,其迁移及侵袭能力明显增强。两种不同转移能力的肝癌细胞相互比较,高转移性的细胞缺氧后变化较低转移性细胞更为明显。结论:缺氧环境可导致肝癌细胞发生上皮-间质转化,增强细胞的迁移和侵袭能力,引起肝癌细胞远处转移,且转移能力强的细胞受缺氧的影响更为明显。
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