论文部分内容阅读
增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)是导致视网膜复位手术失败的主要原因,同时也是一种较严重的致盲性眼病。关于PVR的治疗方面的研究进展很快,但目前较成熟且被广泛应用的治疗方法仍为实施玻璃体视网膜手术。随着手术技术的不断提高和显微器械的不断改进,PVR手术成功率大大提高,但手术治疗并不能解决术后PVR复发,仍有部分患者术后PVR复发,因此药物治疗PVR受到重视,针对PVR不同发病环节的药物被广泛研究。由于细胞的增殖是PVR重要的病理过程,故抑制细胞增殖的药物成为一大热点。在参与PVR形成过程的众多增殖细胞中,RPE细胞起到关键作用。本研究利用体外培养的兔视网膜色素上皮(RPE)细胞进行组合药物筛选试验,筛选出能安全、有效地抑制RPE细胞增殖的药物组合方案,以期进一步临床应用,达到预防术后复发或辅助治疗PVR的目的。联合用药的优势在于:药物用量小,毒副作用低,疗效高。目的:通过体外实验,测定维甲酸、三氟拉嗪、槲皮素三药的IC25、IC50,观察其两两组合后对体外传代培养的兔RPE细胞增殖的抑制作用及安全性,筛选出抑制效果好、毒副作用低的药物组合方案。方法:1.用胰酶消化法分离培养成年有色兔RPE细胞并传代。<WP=4>2.应用噻唑兰比色法(MTT),检测不同浓度范围各受试药作用于RPE细胞120小时后的细胞增殖抑制率。3.根据量效关系方程分别求得三药的25%抑制率浓度(IC25)、50%抑制率浓度(IC50)。4.测定各药IC25、IC50两两组合后作用于细胞120小时后的细胞增殖抑制率。5.利用台盼兰染色活细胞计数法、光镜、透射电镜评价药物的细胞毒性。结果:1.维甲酸IC50与槲皮素IC50联合组、三氟拉嗪IC50与槲皮素IC50联合组在给药后72小时细胞全部死亡。2.维甲酸IC50与三氟拉嗪IC50联合组、三氟拉嗪IC25与槲皮素IC50联合组给药后120小时透射电镜观察显示细胞严重变性坏死。3.维甲酸IC50与槲皮素IC25联合组给药后120小时细胞增殖抑制率与单独应用维甲酸IC50时相比较无显著差别(P=0.413)。4.维甲酸IC50与三氟拉嗪IC25联合组给药后120小时抑制率(%)为80.3855±0.5693(P<0.01),细胞活力(%)为97.58±8.33,光、电镜观察,受试细胞无异常表现。5.三氟拉嗪IC50与槲皮素IC25联合组给药后120小时抑制率(%)为79.50±0.9985(P<0.01),细胞活力(%)为97.58±5.00,光、电镜观察,受试细胞无异常改变。结论:1.维甲酸IC50与三氟拉嗪IC25联合组、三氟拉嗪IC50与槲皮素IC25联合组可安全而比单药更有效地抑制体外RPE细<WP=5>胞的增殖;2.将几种药物联合应用,可降低单药浓度,又可提高药物效果,并未出现明显毒副作用,可能成为一种有价值的防治PVR的用药方式。