前列腺癌是男性泌尿生殖系统最常见的肿瘤，在美国肿瘤致死的男性人群中，前列腺癌占第二位，仅次于肺癌。近年来，我国随着人口老龄化和饮食结构的改变，前列腺癌的发病率和死亡率有逐年增高的趋势。前列腺癌转移发生早是治疗失败的主要原因。前列腺癌转移过程中，与细胞周期调节、凋亡、粘附、活动以及新血管生成有关的基因表达谱有明显变化，而且基因表达和疾病发展互为因果。为深入了解前列腺癌细胞的恶性生物学行为，需要建立相应的模型和方法。本研究旨在对人前列腺癌细胞系PC3进行进一步优化选择，以建立更符合临床和实验研究需要的转移性人前列腺癌细胞模型系统，为推动深入研究人前列腺癌转移机理、寻找预测转移的新指标、筛选防治新策略奠定基础。本研究分三部分：一、不同转移潜能的人前列腺癌克隆细胞株的分离和建立；二、体内连续筛选法建立人前列腺癌细胞转移模型；三、不同转移潜能人前列腺癌细胞系中CD44s和nm23-H1基因的表达分析。 一、不同转移潜能的人前列腺癌克隆细胞株的分离和建立 首先对人前列腺癌PC3细胞进行同步化培养，继而采用有限稀释法从其中分离出单个细胞，在体外进行单克隆细胞培养。待每个细胞独立生长成细胞株后，在裸鼠体内进行初步筛选。在形成的15个单细胞克隆株中，通过裸鼠体内接种鉴定，初筛出转移力差别最大的两个细胞株。然后扩大培养，进一步扩大接种裸鼠数，验证目标克隆株，得到高转移性单克隆细胞株PC3-H和低转移单克隆细胞株PC3-L。采用体外生长曲线、染色体分析、软琼脂培养及体外侵袭实验研究发现：两细胞株的生物学特性明显不同。 二、体内连续筛选法建立人前列腺癌细胞转移模型 高转移的克隆细胞株PC3-H接种裸鼠发生自发性肺转移后，取出肺转移灶进行细胞培养，将其进行裸鼠皮下接种，再取生长旺盛的皮下移植瘤前列腺腹叶原位移植进行自发性肺转移筛选，如此连续不断地发生3次自发性肺转移。取出肺转移灶瘤组织进行细胞培养，建立连续传代细胞系，命名为PC3-HM3。经染