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实验目的：初步建立基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱(UPLP-QTof/MS)技术的代谢组学方法,并将该方法应用于脉络宁注射液诱导的急性过敏反应豚鼠血清中内源性代谢物的变化研究,寻找与急性过敏反应相关的潜在生物标志物,为中药注射剂的过敏反应研究提供一个新视角和实验基础。实验方法：1.选择牛血清白蛋白为阳性对照致敏剂,建立脉络宁注射液诱导的豚鼠急性过敏反应模型,通过观察豚鼠主动全身过敏反应(ASA)的宏观体征表现,以及酶联免疫吸附试验对与过敏反应相关指标IgE和组胺水平进行检测,综合评价模型的合理性。2.通过对豚鼠血清样本的前处理条件、色谱条件和质谱条件的优化,并利用质控样本对样本的稳定性和系统的重现性进行验证,建立稳定、可靠的适用于豚鼠血清非靶向代谢组学的UPLP-QTof/MS分析方法。3.通过前面建立的UPLP-QTof/MS分析方法对所采集的3组豚鼠血清进行代谢组学研究,根据主成分分析和正交信号校正偏最小二乘法判别分析结果筛选出差异性代谢物。进一步采用二级质谱分析及对其质谱裂解规律的解析,结合数据库检索及相关代谢途径分析初步推断出13个差异代谢物的结构。实验结果：建立了基于UPLC-Q/TOF-MS的脉络宁注射液诱导豚鼠急性过敏反应血清代谢组学研究方法,致敏豚鼠血清中的溶血磷脂酰胆碱、胆汁酸、神经鞘氨醇和脂肪酸类代谢通路都发生了紊乱。在溶血磷脂酰胆碱类代谢物中,lysoPC(16:0)、lysoPC(18:0)、lysoPC(18:2)的含量明显高于正常对照组。在胆汁酸和神经鞘氨醇类物质中,与正常对照组相比,甘氨胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、牛磺胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸、神经鞘氨醇、1-磷酸鞘氨醇、二氢神经鞘氨醇在致敏豚鼠血清中比在健康豚鼠中低。脂肪酸类代谢物中,硬脂酸、油酸和花生四烯酸的含量较健康豚鼠升高,提示致敏豚鼠可能在细胞膜稳定性、细胞间信号转导及能量代谢方面发生紊乱。实验结论：本研究首次将代谢组学引入到脉络宁注射液的过敏反应研究中来,建立了稳定可靠的基于UPLC-Q/TOF-MS的豚鼠血清代谢组学分析平台,发现致敏过程主要与溶血磷脂酰胆碱、胆汁酸、神经鞘氨醇及脂肪酸类的代谢有关,为下一步继续鉴定和验证相关的代谢标志物,推动中药注射剂致敏反应检测奠定了基础。代谢组学作为系统生物学的一个突破,对中药注射剂的安全性研究具有重要价值。