动脉粥样硬化microRNA表达谱的研究

被引量 : 4次 | 上传用户:XFJ1988
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
【目的】筛选出动脉粥样硬化患者与正常对照者之间差异表达microRNA(miRNA),为了解miRNA在动脉粥样硬化发病机制中的作用及课题组进一步研究miRNA靶向调节ⅡA型分泌型磷脂酶A2(sPLA2-ⅡA)表达在动脉粥样硬化发病机制中的作用奠定基础。【方法】1、收集厦门大学附属第一医院心血管内科门诊与病房确诊的冠状动脉粥样硬化患者3例,健康对照者3例。所有病例均在胸痛等症状发作后48小时内采集外周血液,分离血清。2、抽提样本总RNA,用标记酶将Hy3TM或Hy5TM荧光集团标记质检合格的RNA,采用Exiqon公司的microRNA芯片进行检测,筛选出差异表达的miRNAs。3、为了进一步验证microRNA芯片结果的可靠性,我们挑选出11个具有代表性的差异表达miRNAs分子:过表达的hsa-miR-3655、hsa-miR-548ac、hsa-miR-96-5p、 hsa-miR-1、 hsa-miR-107、 hsa-miR-15b-3p、hsa-miR-126-3p,低表达的hsa-miR-4682、 hsa-miR-610、hsa-miR-504-5p、 hsa-miR-186-3p。采用实时定量PCR方法进行验证,用hsa-miR-423-5p作为内参,所得数据采用2-ΔΔCT方法进行分析。【结果】1、用microRNA芯片筛选出差异表达显著改变(上调或下调2倍以上)的miRNAs分子232个,其中过表达2倍以上的的miRNAs分子134个,过表达5倍以上的miRNAs分子15个,过表达10倍以上的miRNAs分子1个,为hsa-miR-548ac;低表达2倍以上的miRNAs分子98个,低表达5倍以上的miRNAs分子20个,低表达10倍以上的miRNAs分子3个为hsa-miR-3155a、hsa-miR-3158-3p、hsa-miR-371b-5p。总体上动脉粥样硬化患者与正常对照者之间差异性表达显著。2、我们挑选出的11个具有代表性的差异表达miRNAs分子,过表达的hsa-miR-3655、hsa-miR-548ac、hsa-miR-96-5p、 hsa-miR-1、hsa-miR-107、 hsa-miR-15b-3p、 hsa-miR-126-3p,低表达的hsa-miR-4682、hsa-miR-610、hsa-miR-504-5p、 hsa-miR-186-3p,经实时定量PCR验证,结果与芯片结果基本吻合。【结论】1、动脉粥样硬化患者与正常对照者之间miRNAs差异表达显著,建立了动脉粥样硬化miRNAs的完整表达谱。为探讨miRNA在动脉粥样硬化发病机制中的作用提供有效和准确的分子学依据。2、通过运用microRNA芯片筛选出动脉粥样硬化差异表达miRNAs,并经实时定量PCR验证,结果与microRNA芯片表达趋势一致,说明microRNA芯片结果真实可靠,可用于后续研究。3、为下一步研究miRNA靶向调节sPLA2-ⅡA表达在动脉粥样硬化发病机制中的作用奠定了基础。
其他文献
某高速公路路基病害特点是路基填方一侧边坡进水,另一侧边坡出水,路基发生管涌渗透变形,路面产生沉陷与裂缝,发生水毁事件。通过对水毁路基的勘察、处治设计,探讨分析了病害
采用田间小区随机区组试验,以高灌蓝莓品种‘蓝丰’为试材,研究了不施锯末(CK)、土施锯末(TJ)、土施+覆盖锯末(TJ+FJ)和覆盖锯末(FJ) 4种处理对土壤理化性质、高灌蓝莓生长发
南海北部边缘盆地CO2资源丰富,CO2成因类型多,依据CO2通常的成因判识与划分参数及标准(δ13CCO2值和3He/4He值),可将其划分为壳源型(有机和无机)、壳幔混合型及火山幔源型等3
本文通过对昆明市主城区农贸市场内部环境的调查分析,针对蔬菜区内部构造、配套设施等方面存在的弊端,提出相关细节优化数据及施工图例,为今后农贸市场内部环境改造提供一定
为探寻一个适用于发酵型半干罗非鱼片干燥的方法,以干燥罗非鱼为原料制备发酵型半干鱼,分别采用热风与热泵2种干燥方式对发酵型半干罗非鱼片进行干燥,比较了2种干燥方式对发酵型
<正> 我国于1975年培养油菜花药获得成功,在世界上首次诱导出油菜花粉植株。其后国内外约有十余个单位(包括我院)开展了这方面的研究工作,所采用的方法主要是通过诱导愈伤组
妇女在绝经前后出现烘然而热,面赤汗出,精神倦怠,烦躁易怒,头晕目眩,心悸耳鸣,失眠健忘,腰膝酸软,手足心热,或伴有月经紊乱等与绝经有关的症状,称"经断前后诸证"。绝经是女性
分析影响我国科技期刊品牌化建设的因素及存在的问题,探讨其发展战略与对策。认为期刊品牌化建设要突出特色,择优培育;分类实施,重点塑造;实施政策导向,维护期刊品牌;实施品
科技论文的"致谢"有其特定的作用。当前国内有相当数量的科技论文中的"致谢"部分仍存在许多问题。应对论文的"致谢"进行有效审查,以避免或减少不当的"致谢"。