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目的:研究消退素D2对CLP脓毒症模型小鼠肺损伤的保护作用及其分子机制,以及其受体GPR18在脓毒症病人外周血PMNs上表达量与预后的关系。方法:第一部分:消退素D2对CLP脓毒症模型小鼠肺损伤的保护作用及分子机制研究:将雄性C57BL/6小鼠随机分为三组:假手术(SO)组;CLP脓毒症组;CLP+RVD2组。分别予以等体积的PBS及RVD2处理,观察小鼠7天。同样处理的小鼠进行平行实验,造模后24小时处死小鼠,收集小鼠肺组织,观察其肺组织病理变化,测定其MPO活性,使用Western Blot对其分子机制进行探索,收集三组小鼠肺泡灌洗液,测定炎性因子(TNF-α,IL-1β,IL-6)以及白蛋白的区别。第二部分:消退素D2受体(GPR18)在脓毒症患者PMNs中的表达作为判断预后生物标记物的研究1、消退素D2受体-GPR18在PMNs上表达量对脓毒症患者预后的预测作用:选取自2015年4月至2017年4月天津市南开医院ICU脓毒症病人81例,使用流式细胞术检测外周全血中PMNs上GPR18表达量与健康对照30例进行比较。记录患者APACHEII、SOFA评分以及患者相关信息并与GPR18表达量进行统计学分析。使用不同浓度LPS(或相同浓度不同时间)以及TLR4拮抗剂处理健康志愿者PMNs,流式细胞术检测其对GPR18阳性率的影响。2、分别分析中医分型“三证三法”与GPR18阳性率以及28天生存率之间的关系。结果:1、RVD2明显提高CLP模型小鼠的生存率。我们使用生存曲线评估SO组、CLP组、CLP+RVD2组的7天生存率。SO组所有小鼠均存活至7天,CLP组小鼠生存率明显下降,CLP+RVD2组相较于CLP组生存率明显提高。2、RVD2减轻CLP引起的肺组织病理学改变。我们于建模后24h将三组小鼠处死,取出肺组织行HE切片染色,于显微镜下观察,并进行病理学评分。结果显示,RvD2显著减轻CLP诱导的组织病理学改变,致使肺损伤评分下降。3、RVD2降低了脓毒症造成的肺损伤中MPO的活性。建模24小时后,CLP组小鼠肺组织中MPO活性相对SO组明显增高,而经RVD2治疗的CLP组小鼠,其肺组织中的MPO活性则显著下降。4、RVD2降低了CLP小鼠肺组织通透性。建模后24h,小鼠肺泡灌洗液中白蛋白水平显著升高,RvD2可降低其水平。由此得知,RvD2降低了CLP诱导的脓毒症模型组小鼠肺组织的通透性。5、RVD2降低了CLP组小鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β以及IL-6炎性因子的含量。CLP组的促炎因子相较于SO组明显升高,而RVD2组相较于CLP组明显降低。6、RVD2受体(GPR18)于外周血中PMNs上表达量对判断脓毒症患者预后具有一定的临床价值:GPR18阳性率与脓毒症患者病情严重程度呈负相关,并可以帮助判断患者28天存活率。7、病人使用中医“三证三法”分型,各型的GPR18表达量并无明显差异。毒热证组脓毒症病人的28天生存率明显高于非毒热证组。8、LPS-TOLL样受体4(TLR4)抑制了PMNs上GPR18的表达:GPR18表达率的下降与LPS浓度的增加存在剂量依赖关系,与时间亦存在依赖关系。且通过TLR4拮抗剂TAK-242可阻滞这一变化。结论:RVD2可明显改善由CLP引起的急性肺损伤,减少中性粒细胞浸润,抑制促炎细胞因子分泌,减轻组织病理损伤,提高小鼠生存率。RVD2受体-GPR18在脓毒症病人外周血PMN上的表达情况与病情严重性呈负相关。且GPR18的表达受LPS-TLR4信号通路调控。