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胃癌是严重危害人类健康的消化道恶性肿瘤之一,绝大多数是腺癌,其发病原因和机制目前尚未完全明确。已有研究发现,细胞凋亡机制异常在恶性肿瘤的发生发展过程中所起的作用越来越重要。细胞凋亡也称之为“Ⅰ型程序性细胞死亡”,是程序性细胞死亡的一种重要形式,它受到多种基因的严密调控。Caspase是细胞凋亡机制中的必要组成部分,其中Caspase-3、Caspase-9是Caspase家族中参与细胞凋亡的关键分子,而c-IAP1是内源性细胞凋亡抑制剂IAPs家族中的一个重要分子,通过多种途径参与细胞凋亡的抑制,它们在人类很多种恶性肿瘤中存在异常表达。有关c-IAP1在胃腺癌组织中的研究国内尚未见报道,且c-IAP1与Caspase-3及c-IAP1与Caspase-9表达的相关性也未见报道。关于Caspase-3、Caspase-9在胃腺癌中的研究仅限于蛋白水平,且同时研究Caspase-3、Caspase-9在胃腺癌组织中表达及二者的相关性也尚未见报道,Caspase-3、Caspase-9在胃腺癌等恶性肿瘤中的表达水平结果存在争议。因此我们通过检测Caspase-3、Caspase-9和c-IAP1在胃腺癌组织和正常胃黏膜组织中的m RNA和蛋白表达情况,探讨它们在胃腺癌发生发展过程中的作用,并分析它们与胃腺癌临床病理特征之间的关系及三者的相关性,从而为胃腺癌患者的早期诊断、预后判断及和临床靶向治疗提供新的分子靶点。目的:通过检测凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-9和c-IAP1在胃腺癌组织及正常胃黏膜组织中的蛋白及m RNA表达情况,探讨它们在胃腺癌发生发展中的作用及与临床病理特征之间的关系,并分析三者在胃腺癌组织中表达的相关性。方法：1.收集2014年10月至2015年12月河北省承德市多家医院经手术切除并经术后病理证实为胃腺癌的初治患者50例,正常胃黏膜组织40例(距离癌灶边缘>10cm)。2.采用免疫组化SP法检测Caspase-3、Caspase-9和c-IAP1蛋白在胃腺癌组织和正常胃黏膜组织中的蛋白表达水平,并分析Caspase-3、Caspase-9和c-IAP1的蛋白表达与临床病理特征之间的关系以及三者在胃腺癌组织中表达的相关性。3.采用蛋白印迹法(Western blot)检测Caspase-3蛋白、Caspase-9蛋白和c-IAP1蛋白在胃腺癌组织和正常胃黏膜组织中的表达情况,并分析三者在胃腺癌组织中的表达与临床病理特征之间的关系。4.采用实时荧光定量PCR技术(q RT-PCR)检测Caspase-3 m RNA、Caspase-9 m RNA和c-IAP1 m RNA在胃腺癌组织和正常胃黏膜组织的表达情况,进一步分析胃腺癌组织中Caspase-3 m RNA、Caspase-9 m RNA和c-IAP1 m RNA的表达与临床病理特征之间的关系。5.应用SPSS19.0统计学软件进行统计学分析,得出实验结论。方法:结果:1免疫组化检测结果:Caspase-3蛋白和Caspase-9蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达率(分别是34.0%,30.0%),均明显低于正常胃黏膜组织(分别是85.0%,82.5%),差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05)。c-IAP1在胃腺癌组织中的阳性表达率(76.0%)明显高于正常胃黏膜组织(27.5%),差异有统计学意义(P<0.05)。1.1 Caspase-3蛋白和Caspase-9蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达均与组织分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移有关,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05),而与性别、年龄、浸润深度均无关,差异均无统计学意义(P>0.05,P>0.05,P>0.05)。Caspase-3蛋白和Caspase-9蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达高-中分化组、TNM临床分期中的Ⅰ-Ⅱ期组及无淋巴结转移组均明显高于低分化组、TNM临床分期中的Ⅲ-Ⅳ期组及有淋巴结转移组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05)。1.2 c-IAP1蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达与组织分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移、浸润深度均有关,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05),而与性别、年龄均无关,差异均无统计学意义(P>0.05,P>0.05)。c-IAP1蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达高-中分化组、TNM临床分期的Ⅰ-Ⅱ期组、无淋巴结转移组及未浸润浆膜层组均明显低于低分化组、TNM临床分期中的Ⅲ-Ⅳ期组、有淋巴结转移组及浸润浆膜层组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05)。1.3 Caspase-3蛋白、Caspase-9蛋白和c-IAP1蛋白在胃腺癌组织中表达的相关性分析1.3.1胃腺癌组织中Caspase-3蛋白和Caspase-9蛋白的表达呈正相关,差异有统计学意义(rs=0.608,P<0.05);1.3.2胃腺癌组织中Caspase-3蛋白和c-IAP1蛋白的表达呈负相关,差异有统计学意义(rs=-0.613,P<0.05);1.3.3胃腺癌组织中Caspase-9蛋白和c-IAP1蛋白的表达呈负相关,差异有统计学意义(rs=-0.578,P<0.05)。2蛋白印迹(Western blot)检测结果:胃腺癌组织中Caspase-3蛋白和Caspase-9蛋白的相对表达量均明显低于正常胃黏膜组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。胃腺癌组织中c-IAP1蛋白的相对表达量明显高于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05)。2.1 Caspase-3蛋白和Caspase-9蛋白在胃腺癌组织中的相对表达量均与组织分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移有关,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05),而与性别、年龄、浸润深度均无关,差异均无统计学意义(P>0.05,P>0.05,P>0.05)。Caspase-3蛋白和Caspase-9蛋白在胃腺癌组织中的相对表达量高-中分化组、TNM临床分期中的Ⅰ-Ⅱ期组及无淋巴结转移组均明显高于低分化组、TNM临床分期中的Ⅲ-Ⅳ期组及有淋巴结转移组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05)。2.2 c-IAP1蛋白在胃腺癌组织中的相对表达量与组织分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移、浸润深度均有关,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05),而与性别、年龄均无关,差异均无统计学意义(P>0.05,P>0.05)。c-IAP1蛋白在胃腺癌组织中的相对表达量高-中分化组、TNM临床分期中的Ⅰ-Ⅱ期组、无淋巴结转移组及未浸润浆膜层组均明显低于低分化组、TNM临床分期中的Ⅲ-Ⅳ期组、有淋巴结转移组及浸润浆膜层组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05)。3实时荧光定量PCR(q RT-PCR)结果:胃腺癌组织中Caspase-3 m RNA和Caspase-9 m RNA的表达均明显低于正常胃黏膜组织,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05)。胃腺癌组织中c-IAP1 m RNA的表达明显高于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05)。3.1 Caspase-3 m RNA和Caspase-9 m RNA在胃腺癌组织中的表达均与组织分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移有关,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05),而与性别、年龄、浸润深度均无关,差异均无统计学意义(P>0.05,P>0.05,P>0.05)。Caspase-3 m RNA和Caspase-9 m RNA在胃腺癌组织中的表达高-中分化组、TNM临床分期中的Ⅰ-Ⅱ期组及无淋巴结转移组均明显高于低分化组、TNM临床分期中的Ⅲ-Ⅳ期组及有淋巴结转移组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05)。3.2 c-IAP1 m RNA在胃腺癌组织中的表达与组织分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移、浸润深度均有关,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05),而与性别、年龄均无关,差异均无统计学意义(P>0.05,P>0.05)。c-IAP1 m RNA在胃腺癌组织中的表达高-中分化组、TNM临床分期中的Ⅰ-Ⅱ期组、无淋巴结转移组及未浸润浆膜层组均明显低于低分化组、TNM临床分期中的Ⅲ-Ⅳ期组、有淋巴结转移组及浸润浆膜层组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05)。结论:1 Caspase-3 m RNA和蛋白、Caspase-9 m RNA和蛋白在胃腺癌组织的低表达参与了胃腺癌的发生、发展过程,并且都与胃腺癌临床病理特征的TNM临床分期、淋巴结转移和组织分化程度有关,与性别、年龄、浸润深度均无关。c-IAP1蛋白和m RNA在胃腺癌组织中的高表达参与了胃腺癌的发生、发展过程,且与胃腺癌临床病理特征的TNM临床分期、淋巴结转移、组织分化程度及浸润深度均有关,与性别、年龄均无关。2 Caspase-3与Caspase-9在胃腺癌组织中的表达呈正相关;c-IAP1与Caspase-3、Caspase-9在胃腺癌组织中的表达均呈负相关。3 Caspase-3、Caspase-9和c-IAP1在胃腺癌组织中的异常表达参与了胃腺癌的发生、发展,c-IAP1可能通过下调Caspase-3、Caspase-9的表达使得胃腺癌细胞凋亡受到抑制,促进胃腺癌的发生和发展。