蛛网膜下腔出血(subarachnoidhemorrhage, SAH)是指各种原因引起脑血管突然的破裂,血液留至蛛网膜下腔的统称,分自发性和外伤性两类,其中70%-80%的疾病属于外科范畴。它并不是一种疾病,而属于某些疾病的临床症状。蛛网膜下腔出血后继发脑血管痉挛发生率约为70%。如继发有血管痉挛发生,则SAH后2周内的死亡率较未发生血管痉挛者可增加1.5-3倍。影像学上表现脑动脉狭窄及狭窄动脉远端脑区的血流灌注减少,临床亦有相应的缺血表现。而神经细胞在脑血管痉挛后维持正常功能降低凋亡发生依赖于脑循环储备力、脑代谢储备力两方面。目前临床主要为尼莫地平抗血管痉挛及3H治疗改善脑循环来降低死亡率；但在如何改善神经细胞代谢方面来辅助治疗降低神经细胞坏死及凋亡方面尚缺少研究报道。奥拉西坦(Oxiracetam)ORC化学名为：2-(4-羟基吡咯烷-2-酮-1-基)乙酰胺,是一种新的环状GABOB衍生物。是一种能够促进学习,增强记忆力,保护受损神经细胞的新型中枢神经系统药物,可选择性的作用于大脑皮层和海马激活保护或延伸神经细胞的功能恢复,近十年来,国内外应用奥拉西坦治疗各种病理状态下的颅脑损伤,缺氧和慢性脑功能不全等取得了良好的疗效。对脑神经细胞的药理作用被证实,阐明的作用机制包括以下几方面： ORC通过血脑屏障对特异性中枢神经通路发挥刺激作用,能有效提高大脑对氧的利用能力；促进磷脂酰胆碱和磷脂酰乙酰胺的合成；激活腺苷酸激酶,使ATP合成增加,提高ATP转化(即葡萄糖的代谢率),激活糖酵解,脑缺血时可增加葡萄糖的利用,促进脑细胞能量代谢,增加脑内ATP形成及转运,提高脑细胞ATP/ADP的比值；降低脑血管阻力,抑制血小板聚集,改善微循环,增加脑组织血流量；促进受损神经细胞可塑性修复；降低兴奋性氨基酸的神经毒性作用。目前临床上在蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage, SAH)的治疗中作为脑保护剂来改善预后常有应用。多项研究表明了抑制凋亡便可以发挥脑保护作用,因此本研究通过建立大鼠SAH模型来观测海马神经元凋亡情况,并探讨奥拉西坦对神经元凋亡的影响,目的在于为临床上防治SAH后的脑损伤提供理论依据。细胞凋亡是在细胞内外特定的生理或病理性因素的诱导下发生细胞程序化的死亡。目前研究表明,细胞内的基因控制着细胞凋亡的发生和发展。细胞外部因素通过信号转导来影响这些基因的表达或者其表达产物的活化,从而间接地调控细胞发生凋亡。有关凋亡机制的研究有很多,不同种类、不同生长发育阶段的细胞有其不同的细胞凋亡路径,但是这种不同主要表现在其早期诱发凋亡的分子机制有差别很大,但是凋亡一起始,不同的早期凋亡信号都会汇集到一条共同的执行路径上,导致细胞产生相似的特征性的形态学和生化改变,而目前研究表明Caspase3是Caspase家族中重要的一员,且被证实处于凋亡执行通路的下游,是各种凋亡通路中的共同下游效应部分,它直接或间接酶解一系列细胞存活所必需的功能蛋白,引起细胞凋亡。Bcl-2家族在神经细胞的凋亡抑制过程中是一个重要的凋亡抑制基因,Bcl-2蛋白可以通过降低细胞内及细胞核内Bax的浓度,直接通过影响线粒体外膜通透性的改变来阻止凋亡信号的转导。Bax是一种主要的促凋亡基因,其诱导凋亡的机制是通过Bax同源二聚体的形成来完成,Bcl-2蛋白的抑制凋亡需要通过与Bax结合形成异源二聚体来实现,Bcl-2/Bax组成一个相对平衡体系,Bax过表达时就表现细胞凋亡加速,Bcl-2过表达时就表现细胞凋亡被抑制,Bcl-2/Bax的比率决定了细胞凋亡是否发生。其作用机制经研究证实为Bax参与线粒体膜结构的变化,并与Cyte-c的释放相关密切。在凋亡因素的刺激下,Cyte-c的释放和分布受Bax等因素的调控。释放入胞质中的Cyte-c在ATP或dATP的辅助作用下引发Caspase家族的活化来诱导凋亡的发生。[方法]选择成年雄性Wistar大鼠35只,采用新鲜自体股动脉血枕大池二次注入法来建立大鼠SAH模型,将大鼠随机分配为空白对照组、生理盐水对照组、SAH组、奥拉西坦注射液治疗1组、奥拉西坦注射液治疗2组,每组7只,以上各组于术后14天处死,用Real-Time PCR技术检测海马神经组织中凋亡因子Caspase-3和Bax以及抗凋亡因子Bcl-2在各组的变化情况,并用Western blot进一步来验证此变化。[结果]SAH后可引起海马神经组织中Caspase-3和Bax的表达较对照组均有不同程度上升(P<0.01),同时Bcl-2表达也有所上升(P<0.01),均有统计学差异。奥拉西坦注射液治疗1组及2组Caspase-3(?)勺表达较SAH组有下降(P<0.01),奥拉西坦注射液治疗2组Bax表达较SAH组有下降(P<0.01),但是Bcl-2的变化治疗组较SAH组无统计学差异(P<0.05)。[结论]1.实验证实SAH时存在神经细胞凋亡的发生。2.证实了奥拉西坦注射液有抑制凋亡作用,并与剂量相关,由此推断奥拉西坦可以抑制神经组织细胞凋亡,具有脑保护作用；作用机制为增加神经细胞氧和能量利用、改善代谢。