氧化铁纳米颗粒因其具有优良的磁学性质,良好的生物相容性,表面易于功能化及尺寸形貌可控等特点,被广泛应用于磁共振成像,磁热肿瘤治疗,磁靶向药物递送等生物医学领域。在过去15年里,氧化铁纳米颗粒类酶活性特别是类过氧化物酶和过氧化氢酶的研究极大地推进了其在体外检测领域的应用。最近,本课题组利用溴化噻唑蓝四氮唑（MTT）研究四氧化三铁纳米颗粒细胞毒性时,发现四氧化三铁纳米颗粒能够将其还原为甲臜,提示出四氧化三铁纳米颗粒有可能具有类琥珀酸脱氢酶活性。琥珀酸脱氢酶（SDH）,是三羧酸循环中将琥珀酸盐氧化成富马酸盐的功能酶,由于琥珀酸脱氢酶体内活性与癌症等疾病的发生密切相关。因此,探究四氧化三铁纳米颗粒是否具有类琥珀酸脱氢酶活性,有着重要的基础研究与实践应用意义。本论文首先采用尺寸可控的高温热分解法制备18 nm的Fe3O4纳米颗粒,通过配体交换法对颗粒表面修饰羧基得到水溶性Fe3O4纳米颗粒;其次,通过提取细胞线粒体内琥珀酸脱氢酶,建立一套测定琥珀酸脱氢酶活性的方法;最后,利用已建立的琥珀酸脱氢酶活性的检测方法,探究四氧化三铁纳米颗粒是否具有类琥珀酸脱氢酶活性。开展的具体研究内容包括:（1）四氧化三铁纳米颗粒的制备、表征及表面修饰:采用高温有机相热解前驱体羟基氧化铁的方法制备18 nm的Fe3O4纳米颗粒,再通过配体交换,即3,4-二羟基苯基丙酸（DHCA）对油相纳米颗粒进行羧基功能化及水相转移,制备水溶性Fe3O4纳米颗粒。利用TEM、XRD、FTIR及DLS进行表征。数据显示,制备的18 nm的Fe3O4纳米颗粒尺寸均匀,结晶性能良好。DHCA修饰后的Fe3O4纳米颗粒水合粒径为33nm,在水相体系中稳定保存。（2）SDH的提取及活性检测方法验证:由于SDH没有商品化产品上市,被分离后很不稳定,SDH需在提取后立刻使用。在提取了人非小细胞肺癌细胞A549内的琥珀酸脱氢酶后,通过商品化试剂盒硫酸吩嗪甲酯及2,6-二氯吲哚酚（PMS法）检测所提取的琥珀酸脱氢酶的活性。除该方法外,采用铁氰化钾法对新鲜提取SDH以及四氮唑盐MTT法对A549活细胞琥珀酸脱氢酶活性进行了测定。最后,利用高效液相色谱（HPLC）对琥珀酸盐和富马酸盐定量检测,以评价SDH的活性。实验结果表明:PMS法测定SDH活性为0.0385 U/10~4 cell;而铁氰化钾法测定活性为0.050 U/10~4cell。3×10~4个活细胞的琥珀酸脱氢酶产生甲臜的光密度值为1.025±0.062。HPLC中琥珀酸盐与理论产物富马酸盐保留时间分别为5.36 min,6.08 min。定量检测发现PMS法、铁氰化钾法琥珀酸脱氢酶反应体系中琥珀酸盐的转化率分别为92.2%、99.8%,但并未能检测到富马酸盐。（3）四氧化三铁纳米颗粒类SDH活性探究:采用PMS法、铁氰化钾法以及MTT法,即测定DCPIP在600 nm,普鲁士蓝在685 nm以及甲臜在550 nm的吸光度变化评估四氧化三铁纳米颗粒是否具有类琥珀酸脱氢酶活性。然后通过高效液相色谱定量检测琥珀酸盐减少及富马酸盐产生的浓度作为判断标准。实验结果表明:四氧化三铁纳米颗粒在PMS体系中未观察到明显的反应发生,HPLC数据也未能见富马酸盐的产生。在铁氰化钾法中发现对照组的铁氰化钾和四氧化三铁纳米颗粒发生反应,产生了与实验组同样的属于滕氏蓝的颜色吸收,铁氰化钾法并不适于四氧化三铁纳米颗粒类酶活性的研究。四氧化三铁纳米颗粒在MTT反应体系中,发现实验组较对照组有更多的甲臜生成,但HPLC却并未检测到富马酸盐的生成。