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油菜菌核病是由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起的一种植物病害,一般发病率在30%左右,严重的高达80%。核盘菌生命力强、易传播,导致了油菜菌核病难以防治。目前,仍是通过化学农药来防治该病害,但长期使用化学农药不仅对人类健康和生态环境造成危害,而且使病原真菌产生了抗药性,因此有必要选择安全环保的措施防治油菜菌核病。放线菌种类多、分布广、可产生活性物质,利用放线菌控制油菜菌核病具有重要意义。本研究中,以油菜根际土壤为分离源,采用6种培养基(CPA、DPA、SSA、AAG、GS、HV)分离放线菌,并对其进行初步归类。油菜菌核病原真菌为供试菌株,对所获得的放线菌进行活性筛选,同时探究了拮抗菌对油菜菌核病的防治效果。随后分析了拮抗菌株的生理生化特性并对其中一株放线菌进行了次级代谢产物的分离。此外,通过多相分类法鉴定了一株稀有放线菌,增加了菌种丰富度。结果如下:(1)从根际土壤中共分离出467株放线菌,合并后为116株放线菌。形态观察和序列分析结果表明优势菌株是链霉菌(Streptomyces),同时包含一些稀有菌属,如小单孢菌属(Micromonospora)、嗜酸链霉菌属(Streptacidiphilus)、诺卡氏菌属(Nocardia)、韩国生工菌属(Kribbella)、野野村菌属(Nonomuraea)、糖霉菌属(Glycomyces)和拟无枝酸菌属(Amycolatum)。(2)油菜菌核病原真菌的抗性实验表明,6株放线菌sw3、sw15、sw23、sw41、sw66和sw108对病原真菌有抑制作用,抑菌率分别为55.7%、47.3%、51.4%、85.7%、88.5%和14.3%,其中,菌株sw66的抑制效果最好。(3)离体和盆栽试验表明,菌株sw41和sw66的孢子液和发酵滤液均可以显著控制叶片病斑的扩展。其中,经菌株sw66发酵液处理后,离体和盆栽试验叶片均未产生病斑,防效达到了100%。通过形态特征和16S rRNA序列分析确定这2株菌均为链霉菌。(4)对菌株sw66进行发酵条件优化,实验结果表明,当发酵时间为7天、接种量5%、转速200 rpm、装液量80 mL时,在GYM培养基中发酵液活性最大。最优发酵条件下对菌株sw66的次级代谢产物进行分离,得到了3种化合物,分别为胸腺嘧啶核苷、N-乙酰基色氨醇和4-甲基-3,4-二氢-2H-1-萘酮。当N-乙酰基色氨醇浓度为1.0 mg/mL时,对油菜菌核病原真菌的抑菌率为72.5%。(5)通过多相分类学鉴定了一株稀有放线菌NEAU-SW521~T,对该菌及相似菌进行了生理生化特征、形态特征和及分子生物学实验的比较,结果表明其符合韩国生工菌属的特征但与相似菌存在差异,确定了NEAU-SW521~T为韩国生工菌属的一株新种,命名为Kribbella monticola。通过基因组信息预测了菌株NEAU-SW521~T的功能和次级代谢产物。