miRNA-449在胃癌发生中的表达及其作用机制

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目的:通过对miRNA-449基因和E2F1蛋白在胃癌组织中表达的研究,并分析miRNA-449的表达与临床资料的关系,探讨其在胃癌发生中的作用机制,为胃癌早期诊断、有效治疗和预后评估提供依据。方法:将收集到的31对胃癌及癌旁组织标本,提取组织总RNA,茎环法反转录成cDNA,实时荧光定量PCR技术检测niRNA-449基因表达水平;提取总蛋白,Western Blot方法检测E2F1蛋白表达水平。结果1.miRNA-449的表达:miRNA-449a在31例胃癌中相对于癌旁组织有23例(74.19%)表达下调,8例(25.81%)表达上调。miRNA-449a的相对表达水平:胃癌组为3.85±2.45,癌旁组为4.66±2.41,两者相比,miRNA-449a在胃癌中的表达低于癌旁组织,差异有统计学意义(配对t=2.516,P=0.017,P<0.05)。miRNA-449b在31例胃癌中相对于癌旁组织有24例(77.42%)表达下调,7例(22.58%)表达上调。miRNA-449b的相对表达水平:胃癌组为3.66±2.54,癌旁组为4.27±2.33,两者相比,miRNA-449b在胃癌中的表达低于癌旁组织,差异有统计学意义(配对t=2.525,P=0.017,P<0.05)。其中miRNA-449a和miRNA-449b在胃癌组织中有21例表达一致下调,6例表达一致上调。niRNA-449c在31例胃癌中相对于癌旁非肿瘤组织有18例(58.06%)表达下调,13例(41.94%)表达上调。miRNA-449c的相对表达水平:胃癌组为2.82±1.98,癌旁组为3.05-2.05,两者相比,miRNA-449c在胃癌组织与癌旁组织中的平均表达无统计学意义(配对t=0.679, P=0.503, P>0.05). miRNA-449a/b/c在胃腺癌细胞株(BGC-823)中的表达均低于正常胃黏膜细胞株(GES-1) (P=0.003/0.017/0.005, P<0.05)。2. miRNA-449a/b的表达与临床资料的关系:miRNA-449a/b的表达变化与淋巴结转移显著相关。miRNA-449a/b在18例有淋巴结转移的样本中均有17例表达下调(94.45%),13例无淋巴结转移的样本分别有6例(46.15%)和7例表达下调(53.85%),淋巴结转移组与无淋巴结转移组miRNA-449 a/b的下调比例,经Fisher确切概率法检验,差异有统计学意义(P=0.004/0.012,P<0.05)。而miRNA-449a/b在胃癌中的表达变化与患者的年龄、性别、肿瘤的直径、肿瘤的浸润深度以及分化程度等无相关性。3.E2F1蛋白的表达:E2F1在17例胃癌中相对于癌旁组织有13例(76.47%)表达上调,4例(23.53%)表达下调。E2F1的相对表达水平:胃癌组为1.14±0.49,癌旁组为0.97±0.41,两者相比,E2F1在胃癌中的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(配对t=2.138,P=0.048,P<0.05)。结论:1.在胃癌中,存在niRNA-449a/b基因的低表达和E2F1蛋白的高表达,提示miRNA-449a/b口E2F1与胃癌的发生相关。2. miRNA-449a/b在胃癌中的表达变化与淋巴结转移相关,提示miRNA-449a/b可能作为判别胃癌预后的指标之一。
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