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目的:筛选异常黏液质证候及药物干预大鼠阴茎组织差异表达miRNA,建立候选miRNA标志物体系,验证miR-140-3p及miR-486两项关键指标,探讨其生物学意义。方法:取80只性功能正常SD雄性大鼠,从中随机抽取10只大鼠设为正常对照组(N),余70只为造模组,用芫荽实+菠菜实+湿寒性环境的干预条件建立异常黏液质证候模型。动态观测大鼠生物学表征与勃起功能改变,至确认已建立稳定的异常黏液质证候动物模型大鼠,通过APO勃起实验和交配实验筛选出均未能成功勃起和交配的大鼠,即阳痿病证模型,随机分为阳痿病证模型组(BM)、阳痿病证药物组(BY),用于其他实验;其余未成阳痿模型的大鼠,随机分为证候模型组(ZM)、证候药物组(ZY)。药物(伊木萨克片)干预时间为3周,干预期间全程动态观测其生物学表征、勃起能力和性行为能力。实验终结时,取阴茎组织,提取总RNA进行miRNA Illumina高通量测序,进行数据分析。筛选出异常黏液质证候及药物干预相关的差异表达的miRNA,对这些差异表达miRNA进行聚类分析。扩大样本量,对候选差异表达的miRNA进行实时荧光定量PCR(Real-time qPCR)检测,验证其与测序结果的可靠性,并对验证的miRNA进行下游靶基因预测,预测靶基因的GO功能注释以及KEGG pathway分析。结果:(1)生物学表征观测结果:与正常对照组相比,模型组随着造模时间延长逐渐出现少动,毛发乱无光泽,小便清、淡,大便软,不成形,舌苔白腻舌质暗,体重增长缓慢,饮食量增多,饮水量减少,尿和大便量增多等表现。经伊木萨克片对证干预后生物学表征得到有效改善。(2)APO实验与交配实验结果:与正常对照组相比,模型组造模因素干预后,随着时间延续,勃起潜伏期显著延长,勃起次数显著减少。同时爬背潜伏期、插入潜伏期、射精潜伏期显著延长,而爬背次数、插入次数、射精次数显著减少,经对证维药伊木萨克片干预后,其勃起潜伏期明显缩短,勃起次数显著增加,爬背潜伏期、插入潜伏期、射精潜伏期明显缩短,而爬背次数、插入次数、射精次数显著增加。(3)Illumina Hiseq高通量测序结果:证候模型组与正常对照组相比,差异显著的miRNA有147个,其中以log2 Ratio的绝对值>0.8为条件,最后确定与证候相关候选差异表达的miRNA 15个,其中13个miRNA上调,2个miRNA下调。证候药物组与证候模型组相比,差异显著的miRNA有131个,其中以log2 Ratio的绝对值>0.8为条件,最后确定候选差异表达的miRNA 3个,均下调,伊木萨克片干预出现逆转变化的miRNA有2个。(4)实时荧光定量PCR验证结果:miR-140-3p和miR-486表达结果与高通量测序一致。与正常对照组相比,证候模型组miR-140-3p表达水平升高,但差异无统计学意义(P(29)0.05)、miR-486表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与证候模型组相比,在证候药物组miR-140-3p、miR-486表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)成功制备维医异常黏液质证候大鼠模型,其定量和定性的生物学表征符合维吾尔医临床证候特点,同时出现勃起潜伏期明显延长,性行为能力明显减退等特点,伊木萨克片干预能显著改善生物学表征及性功能减退。(2)经对筛选出的差异表达miRNA进行生物信息学研究综合分析,认为miR-140-3p、miR-143-3p、miR-486等15个miRNA可作为异常黏液质证候选分子标志物,miR-434-3p、miR-486等3个miRNA可作为伊木萨克片干预靶点的候选分子标志物。(3)经验证后,认为miR-486可作为异常黏液质证发生相关的标志物,miR-140-3p、miR-486可能是伊木萨克片干预的靶点分子标志物。miR-140-3p可能通过其靶基因TGF-?3参与组织纤维化的形成,而miR-486可能通过其靶基因PTEN参与糖脂代谢的调控,但需进一步验证。