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目的:了解河北正定地区自然人群中乙型肝炎病毒(HBV)基因型、血清型分布情况及基因型与血清型的关系;了解当地自然人群中HBV S基因α抗原决定簇氨基酸变异以及C基因A1762T/G1764A双位点变异和G1896A变异情况;初步探讨HBVα抗原决定簇氨基酸变异与实施HBV计划免疫之间的关系。了解当地HBsAg家庭聚集情况,利用分子生物学特征进一步描述当地人群感染HBV家庭聚集特点。方法:2005年于河北正定地区以家庭为单位整群采集血清样品,采用固相放射免疫法(SPRIA)进行乙肝五项感染指标检测,选择其中表面抗原(HBsAg)阳性的血清,经过QIAamp DNA Blood Mini Kit提取HBV DNA,采用巢式PCR扩增S基因区段,C基因区段,进行序列测定。利用生物信息学软件Lasergene 6.0将其与Genebank中A-H各基因型标准序列进行对比分析,确定HBV的基因型并通过核苷酸序列推测血清型。利用软件将核苷酸序列转换为氨基酸序列,进行HBVα抗原决定簇氨基酸位点变异分析,并对HBV C基因中CP和BCP常见突变A1762T/G1764A、G1896A突变进行描述和分析。对户籍明确人群以HBsAg为指标进行负二项分布拟合优度检验分析当地HBsAg的家庭聚集情况;利用MEGA4.0.1软件对样本S基因测序结果与C基因测序结果分别进行核苷酸同源性比对分析,使用邻居连接方法(Neighbor-Joining法)中p-distance统计方法构建并绘制系统发生树,bootstrap 1000次进行验证,分析同一家庭成员核苷酸相似性。用SAS 8.0整理分析实验结果,以X~2检验及fisher确切概率法进行统计学分析,以P＜0.05为有统计学意义。结果:本研究11478份血清样品中,共检测出HBsAg阳性血清549例,扩增出HBV S区基因序列并且成功测序434例,其中HBV B型基因11例,对应血清型为adw(90.9%)和ayw(9.1%);C型基因417例,对应的血清型为adr(95.2%),adw(3.6%),ayr(1.0%)和ayw(0.2%);D型基因6例,为ayw(66.7%)和adr(33.3%)血清型。当地流行HBV的α抗原决定簇氨基酸突变率为6.7%,HBV计划免疫后出生人群中126、143位氨基酸突变率显著高于计划免疫前出生人群。扩增出HBV C区基因序列并成功测序393例,基本核心启动子BCP A1762T/G1764A突变率40.5%;前C区G1896A的突变率为18.1%;HBeAg的表达与否与BCP双突变(P=0.0204)或前C区G1896A(P=0.0003)突变有明显相关性。收集户籍明确村民血样10011份,涉及家庭3619个,其中HBsAg阳性者533人,分布于455个家庭。河北正定地区HBsAg家庭聚集性不符合负二项分布(X~2=6.75,P＜0.05),聚集指数P=0.64;HBV C基因系统进化分析结果提示研究家庭中53.3%的HBsAg聚集家庭存在HBV家庭内传播。结论:河北正定地区HBV基因型以C型为主,有少量B型和D型;血清型以adr型为主,同时有adw型,ayr型和ayw型;HBV不同基因型与血清型存在一定的相关性:自然人群中存在多种HBV S区α抗原决定簇突变,其中126、143位氨基酸突变可能为与疫苗相关突变;HBV A1762T/G1764A双位点变异和G1896A变异可能与HBeAg表达有关。尚不能认为当地HBsAg阳性者分布有家庭聚集性,HBV分子生物学证据进一步提示当地可能存在HBV母婴传播、夫妻间性传播及父子间水平传播等多种家庭内传播途径。