论文部分内容阅读
目的:探讨APOE对脂多糖诱导小鼠脊髓片星形胶质细胞NMO样损伤的影响。 方法:⑴把7天大的C57BL/6乳鼠分成两组:野生型(WT)组和基因敲除型(ApoE-/-)组。分别用振动切片机横向切取两组乳鼠脊髓切片放到transwell中培养,每三天换一次培养液。⑵培养到第7天两组脊髓片都用脂多糖处理,同时设立不加LPS的正常对照组,脂多糖孵育的第5天后,取各组脊髓片免疫荧光检测脊髓片水通道蛋白4(AQP4)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)及小胶质细胞标记物Iba1的表达并在免疫荧光镜下观察损伤的表现及损伤评分。⑶进一步用ELISA技术检测各组组织培养液中免疫学相关因子TNF-a表达情况。⑷用硝酸还原酶法检测各组组织培养液中炎性介质NO的表达情况。 结果:①对照组、WT组、APOE-/-组比较,脂多糖造模后免疫荧光镜下观察APOE-/-组小鼠脊髓片的损伤最明显,免疫荧光的评分最高,而WT组次之,对照组的免疫荧光评分最低。评分有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,WT组和APOE-/-组Iba1的表达均升高且APOE-/-组比WT组升高更明显。②ApoE-/-LPS组、WT-LPS组、对照组 TNF-α浓度分别是55.90±6.41pg/ml、27.42±5.54pg/ml、5.09±1.34pg/ml(n=10)-x± s其他组组织培养液中TNF-α浓度均较对照组高,且ApoE-/-组比WT组高。③ApoE-/-LPS组、WT-LPS组、对照组NO浓度分别64.46±8.14μmol/L、42.29±4.70μmol/L、25.54±4.28μmol/L(n=10)-x± s其他组组织培养液中NO浓度均较对照组高,且ApoE-/-组比WT组高。 结论:⑴脂多糖刺激小鼠脊髓片可以激活小胶质细胞破坏星形胶质细胞,造成NMO样病理改变。⑵缺少APOE的脊髓片免疫荧光下观察显示出更严重的损伤。⑶APOE缺乏导致小胶质细胞过度活化,TNF-ɑ,NO等炎症因子的表达升高,导致炎症反应,可能是APOE起到保护神经的作用的原因之一。