【摘 要】
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目的:探讨前列腺素E2（PGE2）受体EP1-4在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达变化,对比白藜芦醇（RES）对上述损伤过程的调节,明确RES对视网膜的保护作用。方法:1.体外研究:取2-3月龄的SD大鼠的视乳头筛板部位的组织培养原代星形胶质细胞（AS）。用原代神经胶质细胞培养体系培对星形胶质细胞前两代进行纯化培养与细胞鉴定。培养环境加入表皮生长因子（EGF）刺激星形胶质细胞出现反应性变化,观察白
【基金项目】
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国家自然基金项目NO.81260148
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目的:探讨前列腺素E2（PGE2）受体EP1-4在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达变化,对比白藜芦醇（RES）对上述损伤过程的调节,明确RES对视网膜的保护作用。方法:1.体外研究:取2-3月龄的SD大鼠的视乳头筛板部位的组织培养原代星形胶质细胞（AS）。用原代神经胶质细胞培养体系培对星形胶质细胞前两代进行纯化培养与细胞鉴定。培养环境加入表皮生长因子（EGF）刺激星形胶质细胞出现反应性变化,观察白藜芦醇对视网膜保护的分子机制:a.EGF（40ng/ml）刺激AS细胞,通过免疫荧光的方法观察EP1-4定位表达,用蛋白质印迹检测细胞内GFAP、i NOS、EP1-4的表达;b.EGF+白藜芦醇（100μM）共同处理AS细胞,蛋白质印迹检测细胞内EP1-4的表达。2.取SD大鼠建立0天、3天和7天的视网膜缺血再灌注损伤模型的体内研究:a.用免疫组织化学染色观察模型前后内层视网膜厚度变化和EP1-4在视网膜中的定位;b.用蛋白质印迹检测正常组与模型组中COX-2、i NOS、EP1-4的表达;c.加入白藜芦醇模型处理组与单独模型组对应比较COX-2、i NOS的表达。Spss统计分析软件进行统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义。结果:1.体外结果:a.原代星形胶质细胞中GFAP的荧光表达;b.EGF刺激星形胶质细胞GFAP表达增加;c.免疫荧光可见EP1、EP3表达在细胞胞膜与胞核中,EP2、EP4表达在细胞胞质中,EGF刺激后其定位表达不变;d.EGF刺激星形胶质细胞中EGFR、i NOS和EP1、EP2和EP4的表达增加,其中EGF+白藜芦醇组的细胞内EP2表达降低;2.体内结果:a.免疫组化示EP1-4在视网膜胶质细胞中有表达,内层视网膜厚度在第7天模型为1.975μm,对比加入白藜芦醇后的第7天模型,内层视网膜厚度平均为4.345μm;b.EP1-4受体均在视网膜缺血再灌注模型的第3天表达明显增加,第7天降至正常水平;c.单独模型组的COX-2第1天表达增加,i NOS第3天表达增加;加白藜芦醇的模型处理组COX-2第1天较单独模型组表达下降,i NOS第3天较单独模型组表达下降。结论:白藜芦醇对大鼠急性视网膜缺血再灌注损伤模型的视网膜有保护作用,这项药理机制的研究为临床上运用白藜芦醇保护视网膜提供理论依据。
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本文以米渣蛋白为原料,通过生物酶解、喷雾干燥的方法制备米渣肽,通过对酶解过程中米肽表面疏水性、巯基含量、内源荧光、粒径、水解度、二级结构、氨基酸组成和分子量分布等指标分析,探讨过程变化的影响及其规律。研究了米渣多肽在加工储藏过程中各因素变化对其功能尤其是抗氧化性稳定的作用及其机制。以胰蛋白酶+风味蛋白酶,中性蛋白酶+风味蛋白酶分别制备两种肽RDPH-1和RDPH-2,每隔一定时间取样,测定酶解过程
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