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观察不同检测试剂盒、不同抗原修复方法及修复液对COX-2表达的影响；探讨COX-2.VEGF、E-cad蛋白及基因在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及与临床病理特征之间的关系；COX-2与VEGF、E-cad在乳腺浸润性导管癌组织的相互关系。收集中国人民解放军251医院病理科2008-2009年存档的乳腺浸润性导管癌术后标本70例、乳腺纤维腺瘤30例、乳腺导管内癌30例及乳腺单纯性增生30例,每例挑选最大肿瘤面积的组织蜡块,常规石蜡切片4μm,65-70℃烤片1-1.5h。采用LM/WM-EDTA缓冲液抗原修复结合ElivisionTM法和原位杂交技术检测30例乳腺单纯性增生、30例乳腺纤维腺瘤、30例乳腺导管内癌和70例乳腺浸润性导管癌中COX-2、VEGF、E-cad蛋白及基因的表达；选用即用型和浓缩型COX-2单克隆抗体为70例乳腺癌组织免疫组化染色的标记,浓缩型COX-2以1：80浓度稀释；实验分为抗原不修复组和抗原修复组,抗原修复组又分为为高压锅-EDTA(修复组Ⅰ)、高压锅-CA(修复组Ⅱ)、LM/WM-EDTA(修复组Ⅲ)、LM/WM-CA(修复组Ⅳ)。1.浓缩型COX-2的表达率明显比即用型COX-2高,且部分即用型阴性者浓缩型阳性,两者相比差异有统计学意义(χ2=4.83,P<0.05)；抗原修复组染色比未经抗原修复组好,有统计学意义(P<0.01)；修复组Ⅰ与修复组Ⅲ或修复组Ⅱ与修复组Ⅳ相比,修复组Ⅰ或修复组Ⅱ抗原修复染色效果相对好,但无统计学意义(P>0.05)；修复组Ⅰ与修复组Ⅱ或修复组Ⅲ与修复组Ⅳ相比,修复组Ⅰ或修复组Ⅲ抗原修复染色效果较好,两者相比有统计学意义(P<0.01)。2.COX-2蛋白及mRNA在乳腺单纯性增生、乳腺纤维腺瘤、乳腺导管内癌、乳腺浸润性导管癌中的阳性率分别为(10%、16.6%)、(23.3%、30%)、(46.6%、53.3%)、(72.8%、74.2%),差异有统计学意义(P<0.01); COX-2蛋白和COX-2mRNA之间无统计学意义(P>0.05)。COX-2蛋白和mRNA表达均与淋巴结转移有关,与年龄、肿瘤大小和组织学分级无关(P>0.05); 3. VEGF蛋白及VEGF mRNA在乳腺单纯性增生、乳腺纤维腺瘤、乳腺导管内癌、乳腺浸润性导管癌中的阳性率分别为(3.3%、10%)、(26.7%、33.3%)、(50%、56.6%)、(65.7%、71.4%),差异有统计学意义(P<0.01); VEGF mRNA和蛋白之间无统计学意义(P>0.05)。VEGF mRNA表达与淋巴结转移有关(P<0.05),与年龄、肿瘤大小和组织学分级无关(P>0.05); VEGF蛋白表达与淋巴结转移、组织学分级有关(P<0.05),与年龄、肿瘤大小无关(;P>0.05)。4.E-cad蛋白和mRNA在乳腺单纯性增生、乳腺纤维腺瘤、乳腺导管内癌、乳腺浸润性导管癌中的阳性率分别为(93.3%、96.6%)、(90.0%、93.3%)、(43.3%、46.6%)、(32.8%、35.7%),差异有统计学意义(P<0.01)；E-cad蛋白和mRNA表达之间无关(P>0.05)。E-cad蛋白和mRNA表达均与淋巴结转移和组织学分级有关(P<0.01),与年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。5.COX-2、VEGF蛋白及mRNA在乳腺浸润性导管癌中的表达呈正相关(R=0.64,P<0.01,R=0.44, P<0.01)。COX-2、E-cad蛋白和mRNA在乳腺浸润性导管癌中的表达呈负相关(R=-0.49,P<0.01；R=-0.26,P<0.05)。即用型COX-2在乳腺癌中的表达存在假阴性,因此建议使用浓缩型COX-2抗体；光波／微波-EDTA修复COX-2抗原可显著提高免疫组织化学染色的敏感性,且染色定位准确、阳性率高及操作简单、安全、不易掉片等优点。COX-2蛋白与COX-2 mRNA、VEGF蛋白与VEGF mRNA、E-cad蛋白与E-cad mRNA之间的表达无统计学意义,说明蛋白水平与基因水平无差别。COX-2、VEGF、E-cad参与了乳腺癌的发生发展,且都与淋巴结转移有关,可作为乳腺癌预后的标志物。COX-2的表达与VEGF呈正相关、与E-cad呈负相关,进一步表明三者在乳腺癌细胞增殖、浸润转移方面起着重要作用。