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背景：已有的研究认为VHL基因在原发性散发性肾透明细胞癌(RCC)发病中起重要作用,但肿瘤形成机理仍有较多争论。VHL存在于细胞浆，与其他一些蛋白形成E3连接酶复合物，泛素化降解其他蛋白。缺氧诱导因子（HIF)是近年来研究较为热门的与肿瘤形成有关的因子。在常氧状态下,HIFα的脯氨酸羟基化,与VHL蛋白结合,于是触发泛素-蛋白酶体[ubiquitin-proteasome]蛋白水解途径，使其迅速降解[15]。前期研究发现，在肾癌细胞株及临床肾透明细胞癌中，VHL蛋白促进HIF-1αmRNA的表达。进一步的研究发现，VHL蛋白对HIF-1α基因转录具有促进作用，但其分子机制不明，VHL蛋白对HIF-1αmRNA表达的影响未见文献报导。前期研究结果提示，VHL蛋白不仅可以从蛋白水平调控HIF1α的表达，而且可以从分子水平上调控HIF-1αmRNA的表达。目的：基于上述理论背景，本研究目的在于初步求证肾细胞癌中VHL蛋白和HIF-1α基因中的转录调控区域有关联，并能促进HIF-1αmRNA表达，进一步明确其分子机制及意义。方法：Western blot检测VHL蛋白表达量显示RCC4VHL(-)细胞株VHL蛋白表达量为零，差异具有统计学意义(P＜0.05).说明此细胞株VHL基因敲除成功。通过实时荧光定量PCR检测, VHL阴性肾癌细胞株与VHL阳性肾癌细胞株存在HIF-1αmRNA的表达差异，VHL阳性肾癌细胞株(RCC4T3-14) HIF-1αmRNA的表达明显高于阴性肾癌细胞株(RCC4)，差异具有统计学意义(P＜0.05)。该实验至少重复3次。结果：通过Western blot检测VHL蛋白表达量及差异确定RCC4VHL(-)细胞株VHL蛋白表达量为零，差异具有统计学意义(P＜0.05).说明此细胞株VHL基因敲除成功。通过实时荧光定量PCR检测，RCC4VHL(-)VHL阴性肾癌细胞株(RCC4)与VHL阳性肾癌细胞株(RCC4T3-14)存在HIF-1αmRNA的表达差异，VHL阳性肾癌细胞株(RCC4T3-14) HIF-1αmRNA的表达明显高于阴性肾癌细胞株(RCC4)，差异具有统计学意义(P＜0.05)。该实验至少重复3次。结论：VHL蛋白不仅可以从蛋白水平下调HIF-1α蛋白，而且可以从分子水平促进HIF-1αmRNA表达，VHL蛋白的结构提示，pVHL不是一个直接与DNA结合的转录因子，其可能通过一个中间物质作用于HIF-1α基因，调节其转录和表达，这个中间物质还不明确，需进一步研究。