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目的：探讨纳米磁珠-实时荧光聚合酶链反应(MNP-RT-PCR)技术在结直肠癌和腺瘤性息肉的粪便筛查中应用的可行性,并与便潜血筛查方法作对比；同时探索应用MNP-RT-PCR技术检测肠镜刷检样本中的COX-2的表达,用于结直肠癌、腺瘤性息肉和正常黏膜三组人群的鉴别中的可行性。方法：1、在2012年6-12月天津市筛查患者中通过确定的高危因素选取500例高危患者,到人民医院行肠镜下病理活检进行确诊,其中结直肠癌组13例、腺瘤性息肉组34例、其他组453例,其他组中正常黏膜组397例,其余为炎性肠病、炎性息肉、黑变病等患者。2、在500例患者中分别取少量粪便(约1g),利用纳米磁珠技术提取粪便中的总RNA,再利用RT-PCR技术特异扩增总RNA中的COX-2,采用Ct值相对定量分析,即通过比较各组2-△△Ct值,间接得出各组表达量的差异。采用SPSS17.0统计学软件,对500例患者行MNP-RT-PCR方法所得结果进行ROC曲线分析,并作图绘制成ROC曲线计算曲线下面积AUC,取敏感度+特异度的最高值所对应的截断点作为最佳筛查临界点。此时可确定MNP-RT-PCR方法的灵敏度和特异度。同时利用胶体金便潜血法筛查此500例高危患者,计算此便潜血方法的灵敏度和特异度。比较两种方法的灵敏度和特异度。3、同时收集上述高危患者中的444例患者(结直肠癌组13例、腺瘤性息肉组34例、正常黏膜组397例),在肠镜下刷检病变部位(结直肠癌组和腺瘤性息肉组)或正常部位(正常黏膜组),再用MNP-RT-PCR方法检测COX-2表达量,进而比较三组COX-2表达量的差异。结果：1、应用MNP-RT-PCR技术对500例高危患者粪便中COX-2基因的表达进行检测,结直肠癌组COX-2表达量显著高于腺瘤性息肉组(p<0.05)和其他组(p<0.05),腺瘤性息肉组COX-2表达量显著高于其他组(p<0.05)。2、应用MNP-RT-PCR技术筛查高危患者中结直肠癌的灵敏度为76.9%,特异度为74.7%,筛查腺瘤性息肉的灵敏度为70.6%,特异度为76.0%；便潜血法筛查高危患者结直肠癌的灵敏度为61.5%,特异度为64.1%,筛查腺瘤性息肉的灵敏度为41.2%,特异度为63.7%。3、MNP-RT-PCR法检测高危患者肠镜刷检样本中COX-2的表达量,结直肠癌组COX-2表达量显著高于腺瘤性息肉组(p<0.05)和正常黏膜组(p<0.05),腺瘤性息肉组COX-2表达量显著高于正常黏膜组(p<0.05)。结论：1、纳米磁珠技术为一种有效的提取技术,提取的纯度高、质量好、操作简单、工作流程简短,RT-PCR技术的灵敏度较高,二者结合后使核酸的提取效率大大提高。2、对于高危患者中结直肠癌和腺瘤性息肉的粪便筛查,MNP-RT-PCR方法的灵敏度和特异度要高于便潜血,MNP-RT-PCR方法对于高危患者中结直肠癌和腺瘤性息肉的筛查是有效的。MNP-RT-PCR方法所需的取样量更小,而便潜血更简单易行且费用低。3、MNP-RT-PCR技术通过检测结直肠癌、腺瘤性息肉和结直肠正常粘膜中COX-2含量进行鉴别,结果发现结直肠癌组COX-2的表达量显著高于腺瘤性息肉组和结直肠正常粘膜组,腺瘤性息肉组COX-2的表达量显著高于结直肠正常黏膜组。MNP-RT-PCR技术可用于结直肠癌、腺瘤性息肉和结直肠正常粘膜三者的鉴别。4、COX-2含量在结直肠癌、腺瘤性息肉和结直肠正常粘膜三者中呈递减关系,三者在发生、发展中存在着某些必然的联系。5、COX-2在组织中的表达与性别、年龄等因素无相关性。6、在肠镜下不损伤病变部位的前提下,刷检细胞学是很有效的取材方式,避免了活检钳取后出血的可能,但无论是刷检还是活检钳取都面临着行肠镜检查,有些人会倍感痛苦。7、目前行病理检查仍是诊断的金标准,目前无可替代,但此检查繁琐而且耗时长,存在着一些不足,有待改进。