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目的：尖锐湿疣(condyloma acuminatum, CA)是由人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染所引起的性传播疾病,近年来的发病率居高不下,目前在我国性传播疾病中位居第二。典型的CA诊断并不困难,但是临床上仍有一些临床表现不典型的CA,即使皮损行组织病理活检表现仍不典型,给明确诊断和进一步治疗带来了一定困难。寻找高效简便易行的HPV检测手段将有助于CA的诊断和治疗。本文采用自行制备的人乳头瘤病毒HPV6b,11型E7蛋白多克隆抗体作为特异性抗体,通过免疫组化方法检测临床疑似尖锐湿疣皮损活检标本中的HPV6bE7及11E7蛋白的表达,回顾性分析临床疑似尖锐湿疣的石蜡标本的HPV6b、11型检出率,以及与组织病理诊断的符合率。旨在探讨该二个蛋白多克隆抗体应用于疑似尖锐湿疣诊断的可行性及优势,并试图阐述其应用前景。方法：共收集2011年1月-2014年8月期间于浙江大学附属邵逸夫医院皮肤科门诊就诊的、临床表现为外生殖器部位不典型赘生物的手术活检标本41例。回顾分析患者基本信息如年龄、性别以及临床病损、组织病理学特点。以自行制备的HPV6b,11型E7蛋白兔多克隆抗体作为特异性抗体的免疫组化法检测病损组织中的HPV6bE7及11E7蛋白的表达,根据阳性细胞的着色强度以及阳性细胞所占的百分数综合评定,进行半定量评级。统计分析该两抗体对临床表现不典型尖锐湿疣标本的HPV病毒的阳性检测率以及与临床诊断和病理诊断的符合情况。统计分析表皮各层中阳性表达细胞分布,t检验分析表皮各层中阳性表达细胞密度的差异。结果：回顾分析了41例临床疑似尖锐湿疣的皮损进行的常规组织病理检查,其中29例皮损可见典型的CA病理改变,余下12例皮损的组织病理表现则缺乏典型CA的改变,仅表现为乳头瘤样增生或棘层肥厚。实验结果显示,41例皮损标本中,HPV6bE7蛋白阳性表达为34例(即HPV6b型阳性感染率82.93%),HPV11E7蛋白阳性表达为27例(即HPV11型阳性感染率65.85%), HPV6bE7和HPV11E7蛋白总阳性表达38例(即HPV6b和11型总阳性感染率为92.68%)。其中两E7蛋白双阳性表达的皮损组织为23例(即HPV6b型和11型双阳性率为56.10%,提示存在该两型病毒合并感染的病例占56.10%),两E7蛋白表达均阴性的皮损共3例(即该两型HPV感染双阴性率7.32%)。其中阳性表达细胞主要分布于棘层及基底层,在颗粒层相对较少。在12例组织病理无典型CA表现的皮损中,HPV6bE7蛋白阳性表达占10例(即提示HPV6b阳性感染率83.33%),HPV11E7蛋白阳性表达6例(即HPV11阳性感染率为50.00%)；两E7蛋白双阳性表达5例(提示该两型病毒合并感染的病例占41.67%),两E7蛋白总阳性表达11例(即HPV6b型和11型总阳性感染率为91.67%),双阴性表达1例(即该两型HPV感染阴性率为8.33%)。讨论：HPV6b/11E7蛋白多克隆抗体作为特异性抗体对临床可疑CA标本进行的免疫组化染色检测发现,HPV6b与11型的阳性感染率分别为82.93%和65.85%,,与PCR方法检测HPV的阳性率基本相符。两个HPV的E7蛋白表达总阳性率为92.68%,据文献报道,PCR方法检测结果表明尖锐湿疣中超过90%是由HPV6型和HPV11型感染引起的,本实验结果与之亦符合。41例皮损中,HPV6bE7表达阳性而HPV11E7表达阴性的皮损有11例,HPV6bE7表达阴性而HPV11E7表达阳性的皮损则有4例,表明该两抗体在免疫组化检测中没有交叉反应。综上可知该二型抗体免疫组化检测对HPV6b/11E7蛋白的检出率高,敏感性好,特异性强。实验结果阳性表达细胞主要分布于棘层及基底层,在颗粒层相对较少,则考虑与HPV的生活周期有关。12例组织病理无典型CA表现的疑似CA标本中,仅有1例HPV6bE7及11E7蛋白表达均为阴性,HPV6bE7及11E7蛋白的总检出率高达91.67%。提示在这些临床表现、病理组织改变均不典型的疑似CA中,亦有90%以上是由HPV6b型和／或HPV11型感染致病的。对临床表现及病理组织改变均缺乏典型表现的疑似CA以该方法进行检测,可确诊由该二型HPV感染引起的CA,能显著提高诊断率。本实验使用的自行制备的HPV6bE7和11E7抗体对临床疑似尖锐湿疣标本的免疫组化染色的阳性率显著高于文献报道的HPV L1壳蛋白抗体免疫组化染色法；相较于其他检测HPV的分子检测手段,免疫组化有着操作简便,设备及实验室要求低,检测所需时间较短,价格相对便宜等优势。结论：1.以自行研发制备的HPV6b,11型E7蛋白多克隆抗体免疫组化法检测对皮损中HPV6bE7/11E7蛋白阳性检出率高,敏感性高,特异性强。2.相较于PCR、DNA印迹杂交、原位杂交技术等特异性较高的检测方法,本方法具有操作简便、操作及设备要求均较低、价格经济等优点。3.对于通过组织病理活检仍不能明确诊断的疑似CA,以该方法对皮损进行检测,可进一步明确诊断,降低漏诊率。4.以HPV6b,11型E7蛋白兔多克隆抗体为特异性抗体的免疫组化法诊断疑似CA有望在临床进一步推广应用。