荧光纳米粒子DNA探针与核酸适配体筛选

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gmwzg
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文第一部分就聚电解质对水溶性量子点CdTe的荧光保护作用以及量子点在核酸检测中的应用作了相关研究。首先,采用静电吸附的方法合成了聚电解质保护的量子点-聚二烯丙基二甲基氯化铵(QDs-PDADMAC)纳米复合物。该纳米复合物呈现出卷曲的、长度不一的“柔性条带”状,条带宽度约3-5nm。在聚电解质PDADMAC的保护下,量子点的荧光量子产率不但没有降低,且有效地防止了表面巯基类配体的脱落,进而比量子点本身具有更明显的时间稳定性以及抗酸、碱、氧化的稳定性,与此同时,还保持了量子点的生物兼容性。我们利用静电吸附作用将单链核酸探针固定在QDs-PDADMAC纳米复合物条带的表面,制备了探针DNA/QDs-PDADMAC纳米复合物,以此作为能量供体,并以溴化乙锭(EB)标记的dsDNA作为能量受体,建立了一种基于荧光共振能量转移(FRET)的DNA检测方法。与传统的运用化学键共价结合作用将核酸探针固定在纳米粒表面制备荧光纳米探针的方法相比,此方法更加简单,快速。对FRET体系中探针DNA的浓度、EB浓度,NaCl浓度进行了优化,得到最佳检测条件。在优化条件下对DNA进行浓度检测,方法表现出良好的重现性,信号稳定,得到的定量限为7.7nM,线性范围为7.7-61.6nM,且线性关系良好。本方法简单、灵敏,同时实现了无标记的DNA检测。现代分子医学需要大量的探针用于识别和表征各种不同的癌细胞。适配体是一种单链DNA/RNA探针,具有与抗体类似的性质,将作为分子探针广泛的应用于在生物医学领域的应用。本文通过基于细胞的指数富集的配基系统进化技术(cell-SELEX),对完整的活细胞进行适配体筛选,对PCR条件、非特异性结合、筛选压力的调节等过程不断优化,在初始随机DNA文库中初步筛选出了对HL-60细胞特异性结合的适配体。HL-60细胞是急性早幼粒细胞白血病细胞,将其作为靶细胞对文库进行筛选,K562细胞为慢性粒细胞白血病细胞,作为对照细胞进行负筛,以增加适配体的特异性。以细胞为基础的SELEX技术筛选适配体简单,快速且稳健。这种方法可以对复杂的目标样本进行适配体筛选,以产生大量的核酸适配体应用于生物医学和生物技术领域,为分子诊断,治疗和生物标志物的发现铺平了道路。
其他文献
摘 要: 本文针对每种积分类型的特点,通过例题给出恰当的解法,便于学生理解与掌握,使学生避开了题海战术,开拓了解题思路,从而提高学生定积分的计算能力.  关键词: 定积分 原函数 连续  一、引言  定积分被广泛应用在社会实践和自然科学中,如利用定积分求平面图形的面积﹑旋转体的体积﹑旋转曲面的面积﹑平面曲线的弧长等都被看成是定积分的计算问题.定积分是微积分学的重要内容,是研究科学技术和实际问题极其
每谈起文章的拟题与开篇,我脑海常浮现这样的画面:“在一个风和日丽的下午,高等科楼上大教堂里坐满了听众,随后走进一位短小精悍秃头顶宽下巴的人物,穿着肥大的长袍,步履稳健,风神潇洒,左右顾盼,光芒四射……”这是梁实秋笔下的梁任公先生,文章好的开篇,犹如梁任公先生的出场风神潇洒,光芒四射。  如果说文章的开法是“凤头”的话,那么题目就是“凤眼”,考生要借助“凤眼”“暗送秋波”。  一、凤眼传神——拟标题
摘 要: 作文教学一直是家长、老师及社会人事关注的教学重点,长期以来,师生在作文方面投入了大量精力,但是效果微乎其微,语文教学一直在改革。新课改之后,小学作文教学在理念上发生了根本转化,由原来比较功利化变为现在比较人文化,由原来的强迫性表达变为现在自由表达与个性化写作。现在的作文教学主要关注的是学生的学习态度,以及对生活的意义等。教学理念的转变必然会带动教学内容、教学方法、教学形式发生转变。  关
摘 要: “三线五环式”自主学习模式的构建和实践,营造民主和谐的学习氛围,解放学生的时间、空间、双手和大脑,完成自定目标、自我评价、自我实现的心理活动过程,有效培养学生的自主学习习惯和创新精神,进而内化为自己所有,逐步建构自己的良好认知结构。  关键词: 数学课 三线五环式 自主模式  数学教学模式的选择,是决定学生在课堂教学中能否很好地获取知识、形成能力的关键因素。《数学课程标准》提出数学教育要
摘 要: 现阶段我国匮乏创新型人才,因此要重视对创新型人才的培养。由于高中时期数学教育的特殊性,它对学生想象力、辩证思维等要求较高,通过数学学习可以有效提高学生这些方面的能力,同时也带动了创造性思维能力的提高,因此高中数学教学对学生创造性思维的培养作用重大。  关键词: 高中数学教学 创造性思维能力 培养方法  引言  创造性思维最重要的就是在于思维的创造和创新,在高中数学中具体体现在对数学知识的
摘 要:时代的发展与科技的进步给企业人力资源管理带来了变革与机遇,同时也需要面临转变与挑战。要想适应互联网时代背景下经济形势与市场的变化,就需要在原有的人力资源管理模式上引入新思维,不断完善与创新,为企业在互联网大时代下的可持续发展提供充足动力。如何顺应科技的潮流,对人力资源管理理念进行更新,是本文讨论的主题,旨在能有效促进人力资源管理效率的提升,为企业创造丰富效益与可持续发展动力。   关键词:
摘 要: 多元函数的微分学是在一元函数微分学的基础上做的进一步推广,二者虽有很多相似之处,但也存在本质差别.从一元函数到二元函数的这种推广会出现许多新问题,在高等数学的学习过程中,初学者对二元函数的一些性质易产生困惑,出现理解障碍.为此本文运用举例对比的方法阐明在这种类推过程中二元函数性质的升华,这对深入学习和理解多元函数的概念及性质有重要的意义.  关键词: 一元函数 二元函数 性质  一元函数
摘 要: 数学是一门综合性的学科,它对学生解题思维的能力有很高的要求,解题需要学生具有较好的逻辑思维能力、抽象想象能力和推理能力。数学教学的目的在于培养学生的思维能力,这对于数学科目和其他科目的学习有着重要的作用和意义,本文就高中数学解题思维的培养策略进行探析。  关键词: 高中数学 解题思维 培养策略  1.引言  高中数学学习相比于小学数学和初中数学的学习有着更高的要求,一般来说,高中数学是千