嗜肺军团菌LysR型转录调控因子lpg0173的功能研究

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嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)是一种能引起军团病的胞内条件致病菌。人能够通过吸入含军团菌的气溶胶而感染嗜肺军团菌。在感染人体以后,该菌首先被巨噬细胞吞噬,通过其Dot/IcmⅣ型分泌系统分泌效应蛋白募集宿主的内质网和高尔基体膜伪装成含有军团菌的小泡(Legionella-containingvacuole,LCV)从而逃避宿主免疫系统的识别和清除。军团菌在LCV中进行复制增殖后裂解宿主细胞,再开始新一轮的感染,最终导致宿主患军团病。调节军团菌应对各种各样的外界及胞内环境不同基因表达的调控因子对于研究军团菌如何适应复杂的胞内胞外环境尤为重要。   LysR型转录调控因子(LysR-Type of Transcriptional Regulators,LTTRs)在细菌的很多生物过程中发挥重要的调控作用。在军团菌基因组中鉴定到了十多种LTTRs,然而其功能却研究得很少。本论文对军团菌中一个LTTR,即lpg0173进行了系统研究。运用比较蛋白质组学比较了在lpg0173表达最高时期野生型菌株和lpg0173缺失突变株中蛋白组的差异情况,鉴定了三类表达差异的蛋白。结合质谱技术,鉴定了14个差异表达蛋白,其中2个与细菌毒力相关,12个与代谢途径相关。通过荧光光度分析确证了lpg0173是一个负的转录自调控因子,对Mip、flgE也有负的转录调控作用。生理功能研究表明lpg0173对军团菌在贫营养培养基(Modified Ristroph Medium,MRM)中的生长及色素的形成有影响。
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