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p53蛋白是一种重要的肿瘤抑制因子,在细胞周期的阻滞、DNA损伤的修复以及细胞凋亡等过程中发挥着重要作用。大约有50%恶性肿瘤与p53基因突变有关,约50%肿瘤与p53蛋白的活性受到抑制有关。通过增加p53蛋白活性已证明是治疗肿瘤或者预防其转移的有效方案。因此,恢复内源性失活p53的活性具有临床的意义。提前终止密码子(premature stop codons,PTCs)会导致生成截短的p53蛋白,无义突变p53与癌症高度相关。目前已经证明氨基糖苷类小分子能够诱导PTC的通读并恢复功能性全长p53。但是目前缺乏快速和高效使p53能够通读的小分子的高通量筛选方法。在本研究中,我们展示了一种有效的使无义突变p53通读小分子的筛选方法,在大肠杆菌细胞和H1299细胞中构建p53-PTC和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的融合基因。我们的数据表明用氨基糖苷处理细胞后可以通过GFP蛋白的荧光监测到通读全长p53蛋白。这种模型可以扩展到筛选氨基糖苷类抗生素及其类似物、小分子等以通读过早终止密码子。进一步在恢复表达的全长p53蛋白的活性分析中,我们发现在低浓度阿霉素与遗传霉素(G418)联合给药处理细胞后,具有高浓度阿霉素单独给药的效果,这种发现为肿瘤治疗提供了一种新的给药策略。另一方面,在解除体内野生型p53活性抑制的研究中,我们发现p28以及N24多肽具有解除p53活性抑制的作用。前人研究发现p28能够靶向癌细胞,具有一定的抗增生活性和促凋亡活性,p28能过与p53 DBD(DNA binding domain,DNA结合域)相互作用,减少p53的降解,增强p53活性,但其结合机制尚不清楚。N24是一种促进细胞周期停滞的多肽,具有抗肿瘤活性,我们发现N24能与p53DBD相互作用。本研究中,我们侧重于探索利用结构生物学分析p28/N24与p53DBD相互作用的机制。目前完成了p28与p53 DBD复合物、N24与p53 DBD复合物的结晶条件筛选,获得了复合物的晶体,为理性设计有效地恢复p53活性的靶向药物提供了新的策略。