获能赋予精子以增强活性的能力,使精子能够与卵母细胞透明带(ZP)相互作用,进而完成受精过程。获能和低温获能之间有许多相似之处,有研究表明精子获能期间蛋白磷酸化是一个非常重要的事件,获能可能受到泛素-蛋白酶体系统(UPS)的调节,并有研究指出类泛素(SUMO)化与磷酸化和泛素(Ub)化相关联。因此,本试验主要的目的是探究获能与低温获能的猪精子中顶体酶抑制剂(AI)的泛素(Ub)化和类泛素(SUMO)化的修饰水平差异,更加深入地了解猪精子获能过程中蛋白质的修饰与降解机制,为改善猪精子冻融后的质量提供依据。本试验选用杜洛克公猪精液,分为新鲜精液(对照组)、获能处理、诱导顶体反应处理、低温获能处理四个试验组。通过微生物动(静)态图像检测系统(CASA)、SDS-PAGE和蛋白免疫印迹(Western blot)等方法进行检测,每组试验重复5次。试验结果表明:1.获能处理、诱导顶体反应处理、低温获能处理三个处理组的精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著高于对照组(P<0.05);2.获能处理、诱导顶体反应处理、低温获能处理三个处理组精子的AI表达量显著低于对照组(P<0.05);3.获能和诱导顶体反应处理组精子的泛素化水平显著高于对照组(P<0.05),添加E2抑制剂后的精子均未发生磷酸化;4.获能和诱导顶体反应处理组精子的类泛素化水平显著高于对照组(P<0.05),日成上升趋势,随着2-D08抑制剂浓度的增加,各组精子的蛋白酪氨酸磷酸化水平逐渐降低且均低于对照组。本研究得出的结论是:1.公猪精子获能伴随着精蛋白酪氨酸磷酸化水平的上升、泛素化与类泛素化修饰的增强,和顶体酶抑制剂的降解;2.体外抑制泛素化或类泛素化阻碍了公猪精子获能；3.泛素化和类泛素化修饰可能作为公猪精子能的标志物。