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前言 近年来研究证实，β-连环素(β-cat)是至少具有双重功能的蛋白质。其一，与E-钙粘附素形成复合体，介导同型细胞间的粘附与连接；其二，参与Wnt信号转导通路，与多种肿瘤发生有关。子宫内膜癌是妇科三大恶性肿瘤之一，近年来发病有上升趋势。本研究采用免疫组化方法观察了β-cat在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理特征的关系，同时用单链构象多肽性-聚合酶链式反应(SSCP-PCR)法分析了β-cat基因突变与表达的关系以及在子宫内膜癌发生中的作用。 材料与方法 1．标本来源：收集2001年1月～2002年9月在中国医科大学第二附属医院妇科手术切除的31例子宫内膜癌标本和10例门诊刮宫的正常子宫内膜。31例子宫内膜癌按FIGO(1988)标准分期，Ⅰ期25例、Ⅱ期2例、Ⅲ期4例、Ⅳ期0例。组织学分级，Ⅰ级18例、Ⅱ级10例、Ⅲ级3例。组织学类型，内膜样腺癌25例，非内膜样腺癌6例，包括腺角化癌1例、鳞腺癌3例、透明细胞癌1例、浆液性腺癌1例。癌无肌层浸润(Ⅰa期)8例，浸润肌层≤1／2(Ⅰb期)12例，浸润肌层＞1／2(Ⅰc期)5例。患者年龄35-69岁，平均年龄56岁。 2．实验方法：免疫组化采用SABC法染色，加入β-cat单克隆抗体，以PBS替代一抗作阴性对照，每例切片均作常规HE染色。用标准的DNA纯化技术提取DNA。PCR扩增引物序列为CTNNB1-F5′-CCAATCTACTAATGCTAATACCTG-3′，CTNNB1-R 5’－CTGC皿CTGAC177’CA肛AA“－3’。预变性 94℃，2分钟，循环条件为：94℃30秒，55℃30秒f2℃30秒，共35个循环。延伸反应72℃，5分钟。PCR产物变性后加人含5％甘油的10％聚丙烯酸胺凝胶中电泳，硝酸银染色、显影。中174－Hinc 11 Mark－er为分子量标准。 3．结果判定：免疫组化结果判定标准为染色的部位：（）膜表达：棕染仅限于细胞膜，为正常表达；p）浆表达：细胞浆中出现棕染颗粒，门）核表达：染色颗粒定位于细胞核。门＊门归浆／核表达，为聚集表达。 SSCP－PCR分析结果有两种：（二）仅有129hP 和181hP 两条带为正常条带，p）有 129hP＊ 和 310hP三条带为突变条带。 4．统计学处理：采用SPSS统计软件包分析实验结果。对分Cat的表达率和各临床参数的比较用XZ检验和四格表确切概率法。 结 果 ＊p六at在子宫内膜癌中的表达 在31例子宫内膜癌中有23例（7％）表现为p六at聚集，而正常子宫内膜大部分为膜表达，仅30％为聚集表达，差异显著p＜0·05）。 2．卜cat表达与临床病理生物学特征的关系 分cat表达特征与子宫内膜癌FIGO分期、组织学类型、lGO分级有密切关系。I期的 P六at浆／核表达率u4％）明显高于 11。皿厂6％厂88％内膜样腺癌发生公Cat聚集，明显高于非内膜样腺癌门7％入 P＜0．of，且 60％为分化良好的组织学类型（P＜0．05人同时可见，分cat表达与肌层浸润深度无关，均 P＞0．05。 3．子宫内膜癌中p－cat的SSCP－PCR分析 ·2· SSCP方法检测出5例突变条带，全部发生于子宫内膜癌，均为FIGO期，其中4例门0％）为内膜样腺癌，但均缺乏统计学意义（均P＞O．05）。 4·SSCP分析与p－cat表达的关系 SSCP改变与p－Cat表达特征明显相关，突变组5例均为浆／核表达门00阮X明显高于正常组u4坑人P＜o．05。 结 论 1．子宫内膜癌的浆／核表达率明显高于正常子宫内膜，说明p叱at聚集与子宫内膜癌发生有关。 2．p七at聚集尤其与早期、分化良好的内膜样腺癌的发生有关，但与肌层浸润深度无关。 3，基因突变是分cat聚集的重要分子事件，基因突变及公cat聚集是导致子宫内膜癌发生的重要通路之一。