大豆WRKY基因转化烟草(Nicotiana tabacum)的研究

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WRKY蛋白是近年才发现的一类转录因子家族,广泛参与植物对生物与非生物胁迫应答反应。在生物胁迫、防卫反应信号分子、干旱、低温、创伤和重金属等不同的环境胁迫条件下能被诱导表达,同时参与植物发育进程中多种基因的表达和代谢的调控。  本研究以野生型烟草(Nicotiana tabacum)为试验材料,通过根癌农杆菌LBA4404介导的向烟草导入大豆WRKY基因HY22-2和HY23-2基因的遗传转化研究。试验结果表明:用 OD600为0.5的农杆菌侵染5mi,共培养3天条件下,获得的28株转HY22-2基因卡那霉素抗性植株,经PCR检测,7株扩增出特异条带,转化率为17.5%;获得的35株转HY23-2基因卡那霉素抗性植株,经PCR检测,9株扩增出特异条带,转化率为21.7%。用RT-PCR法检测PCR获得的阳性植株,结果均扩增出目的条带,说明目的基因 HY22-2和HY23-2已整合到烟草的基因组中并表达。  本研究从非生物胁迫,盐和低温两个方面对转基因烟草的POD活性、SOD活性和可溶性蛋白含量生理指标进行了系统的测定和分析。结果表明转基因烟草具有较高的耐高盐、低温的能力,在此胁迫条件下可采取自我保护机制以适应非生物胁迫。  对于大豆WRKY转录因子的研究对大豆抗病机理的研究有重要意义,而且对作物育种提高其抗病能力、抗衰老能力也具有十分重要的意义。为WRKY基因遗传转化研究提供参考。
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