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目的:观察不同缺氧条件下胃腺癌细胞系BGC-823中HIF-1α、HIF-2α、HIF-1β和VEGF的表达,探讨三种HIF因子在低氧条件下调控胃癌血管生成的作用差异。方法:分别用150、200、250、275μmol/L Co Cl2模拟肿瘤内部缺氧,缺氧时间分别为:2h、4h、8h、12h、24h、48h、72h。采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测HIF-1α、HIF-2α、HIF-1β和VEGF的mRNA及蛋白表达情况。进一步运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默BGC-823细胞,比较三者沉默VEGF的效果。结果:1.与常氧时比较,缺氧后HIF-1α、HIF-2α、VEGF的m RNA及蛋白表达均随CoCl2浓度增加、时间延长而增加,但三者变化趋势不一致,HIF-1α在缺氧早期迅速升高,之后快速下降;HIF-2α和VEGF则在缺氧晚期表达最高,之后保持稳定。HIF-1βmRNA和蛋白在常氧或缺氧下表达均无明显变化(P>0.05)。2.细胞分别特异性转染HIF-1α、HIF-2α和HIF-1βsiRNA后均能有效沉默各自基因的表达,同时VEGF的表达水平也随之降低,且随HIF-2α的下调幅度最显著(P<0.05)。结论:1.BGC-823胃癌细胞中HIF-1α、HIF-2α和HIF-1β对乏氧刺激表现出不同的应答方式,HIF-1α和HIF-2α可能是胃癌适应乏氧环境的主要缺氧诱导因子;2.RNA干扰能抑制三种HIF基因的表达,并不同程度减少下游VEGF的表达,相较于HIF-1α和HIF-1β沉默途径,切断HIF-2α可能会更有效阻止胃癌血管生成。