花生茎线虫(Ditylenchus arachis n.sp.)新种鉴定、生物学及快速检测技术

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:chengbf0917
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花生茎线虫病发现于山东、河北多个花生产区,为我国首次报道的花生病害。本文对花生茎线虫病的病原线虫种类进行了系统鉴定,研究了病原线虫的相关生物学和快速检测技术,取得了如下主要研究结果:1.危害我国花生的茎线虫为一新种,命名为花生茎线虫(Ditylenchus arachis n. sp.)。新种的鉴别特性:侧唇片明显突出,口针纤细,长8.4-10μm,侧区有6条侧线,交合伞包至尾端的68%-86%,尾长圆锥形;基于rDNA-ITS、28SD2D3及18S区的系统发育分析证实Ditylenchus arachis n. sp的新种地位;致病性接种试验表明D. arachis n. sp可侵染花生(Arachis hypogaea)但不危害甘薯和马铃薯,与腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor)不同。2.描述了花生茎线虫病的症状。通过田间症状观察和接种试验,发病田花生植株高矮参差不齐,缺株断垄,发病中心呈块状分布。受茎线虫侵染的花生植株呈现矮化、黄化,甚至整株枯死等症状;植株地下部表现出根系生长不良、结荚少、固氮菌减少、果荚表面出现黑褐色腐烂斑、种皮褐变皱缩等症状。从受害花生组织如果荚、种粒、胚栓、根茎及根际土壤可以分离出茎线虫虫体。3.创建了花生茎线虫的人工培养技术,用长柄链格孢(Alternaria longipes)和胡萝卜愈伤组织在25-30℃恒温黑暗培养30-60d后可获得较大的线虫量。花生茎线虫的不同地理种群无繁殖力差异。4.初步查明了花生茎线虫的越冬和传播途径。病原线虫可侵染鳢肠、凹头苋、反枝苋、地锦、牛筋草、马唐和狗尾草等花生地杂草;花生茎线虫侵染花生果荚和果粒,以幼虫为主要越冬虫态。花生茎线虫在田间杂草寄主及病花生种荚上越冬,成为病害的初侵染源,病花生种荚是病害远距离传播的主要途径。5.构建了花生茎线虫的快速检测技术体系。设计了一对花生茎线虫特异性引物DF1(正向5’-GGGAAGGCGAAGCTAAGCTA-3’)和DR1(反向:5’-AACTTAGAGGCCAACGAAGCC-3’),在ITS1区扩增出171bp的特异性片段。该引物的可靠性高、特异性强,可实现花生茎线虫的准确、灵敏及快速的检测。
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