论文部分内容阅读
将采集自各地的朽木和碱性土壤进行菌种筛选，从中得到一株丝状真菌FG-2。对该菌株粗酶液的基本性质进行测定，发现其为耐碱性纤维素酶产生菌，葡聚糖内切酶的最适作用pH值为7.2左右，对碱性环境的耐受能力较强，在pH4.4-pH8.0范围内能保持最高酶活的80％以上。经过形态学初步鉴定其为粗壮串珠霉(M.crassa Sh et Dodge)。
采用单因素分析的方法，对其产酶培养基和培养条件进行了优化，找到了最适的生长和产酶条件，提高了产葡聚糖内切酶的能力。实验结果表明，FG-2菌株接种种子的最佳种龄为4d；最适产酶的培养基初始pH为7.0；最适的单一碳源为麸皮，最适的麸皮添加量为2.0％；最适的单一氮源为(NH<,4>)<,2>S0<,4>；最适产酶温度为28 ℃；最适摇床转速为150rpm；用500mL三角瓶装样量最适为150mL左右；培养周期为7-8天。在上述培养条件下，获得的粗酶液CMC酶活最高为1.20 IU/mL利用Bio-Gel P100分子筛层析和DEAE-Sepharose(Fast Flow)、Q-Sepharose(FastFlow)离子交换层析等方法，对FG-2菌株的纤维素酶系进行了分离纯化，得到其中一个内切酶组分，命名为Q I，经过SDS-PAGE检测已提纯为纯酶组分，其分子量接近60，000Da。对其基本反应特性进行测定表明，Q I组分的最适反应温度为55℃；热稳定性不是非常好，酶液保存过程中要注意酶活的损失；其最适反应pH值为6.8 左右；对碱性环境的耐受能力较强，在pH4.4-pH8.0范围内能保持最高酶活的80％以上。