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1.发酵中药对斜带石斑鱼肝细胞氧化损伤的保护作用实验以过氧化氢(H2O2)诱导斜带石斑鱼离体培养的肝细胞,建立石斑鱼H2O2氧化损伤模型,探究银杏叶、甘草等10种单方发酵产物对斜带石斑鱼离体肝细胞的保护作用。用发酵中药处理斜带石斑鱼肝细胞H2O2氧化损伤模型8 h后测定细胞活力(CCK-8)、肝细胞抗氧化指标(T-AOC、GSH-PX、MDA)以及培养液中胞内酶(AST、ALT、LDH)活性。结果显示,细胞活力在H2O2的作用下显著下降(P<0.05),肝细胞受损后培养液中的AST、ALT和LDH含量也随之升高(P<0.05),肝细胞的抗氧化指标(T-AOC、GSH-PX)在H2O2作用下显著降低(P<0.05);经过发酵中药和H2O2共同处理后,发酵银杏叶和发酵甘草的AST和ALT都显著低于其他各组(P<0.05),在发酵银杏叶和发酵甘草的作用下肝细胞的T-AOC、GSH-PX与其他各组相比显著升高(P<0.05),其MDA的含量显著降低(P<0.05)。综合上述结果,表明与其它发酵中药相比,发酵银杏叶与发酵甘草对H2O2诱导的石斑鱼肝细胞氧化损伤有着较强的保护作用。2.饲料添加发酵中药对石斑鱼生长性能、肝脏健康的影响实验以添加0.25%、0.5%发酵银杏叶和0.25%、0.5%发酵甘草的饲料投喂斜带石斑鱼幼鱼,通过测定斜带石斑鱼生长性能相关指标:WGR、SGR、HIS、SR;石斑鱼血浆生化指标:ALT、AST、AKP、T-CHO、TP;石斑鱼肝脏抗氧化的相关指标:SOD、GSH-PX、CAT、MDA;以及肝脏中抗氧化酶基因的表达量:SOD mRNA、GSH-PX mRNA、CAT mRNA,探究发酵中药对石斑鱼生长性能、肝脏健康的影响。结果发现,饲料中添加发酵银杏叶和发酵甘草对斜带石斑鱼的生长性能均没有显著影响(P>0.05)。添加0.5%发酵银杏叶和0.25%、0.5%发酵甘草能显著降低石斑鱼血浆中ALT和AST的含量(P<0.05);添加发酵银杏叶和发酵甘草都能显著提高斜带石斑鱼肝脏抗氧化酶的活性(SOD、GSH-PX、CAT),显著降低肝脏中MDA的含量(P<0.05),其中以添加0.5%发酵银杏叶的一组效果最为显著。添加0.25、0.5%的发酵银杏叶和0.5%的发酵甘草三组能显著上调石斑鱼肝脏中SOD、CAT、GSH-PX基因的表达量(P<0.05),其中以添加0.5%的发酵银杏叶效果最佳。结果表明,饲料中添加发酵银杏叶和发酵甘草各组都能提高石斑鱼肝脏的抗氧化能力,其中添加0.5%的发酵银杏叶对肝细胞的保护效果较好。3.发酵中药对急性亚硝酸盐胁迫下石斑鱼血浆生化指标、肝脏抗氧化的影响。实验以添加发酵银杏叶和发酵甘草的饲料投喂斜带石斑鱼幼鱼,探究发酵中药对急性亚硝酸盐胁迫下石斑鱼血浆生化指标、肝脏抗氧化的影响。亚硝酸盐胁迫后,饲料中添加0.25%、0.5%的发酵银杏叶和0.25%的发酵甘草三组的存活率显著高于对照组(P<0.05)。在添加的各类药物组中,亚硝酸盐胁迫后,饲料中添加0.5%的发酵银杏叶能显著降低血浆中的AST的含量(P<0.05),添加0.5%的发酵银杏叶和0.25%、0.5%发酵甘草能显著降低血浆中的ALT含量(P<0.05),添加0.25%、0.5%的发酵银杏叶和0.5%的发酵甘草能显著降低血浆中的HSP70含量(P<0.05),其中添加0.5%发酵银杏叶达到各组中最低。亚硝酸盐胁迫后,饲料中添加发酵银杏叶和发酵甘草都是显著提高肝脏的SOD、GSH-PX的活性,其中添加0.5%的发酵银杏叶组其胁迫后肝脏中的SOD的活性最高(P<0.05),添加0.5%发酵银杏叶和0.25%、0.5%发酵甘草对石斑鱼肝脏的GSH-PX、T-AOC有显著提高的效果(P<0.05),添加发酵银杏叶和发酵甘草都能减少石斑鱼在胁迫环境下肝脏中MDA的含量(P<0.05)。结果表明,添加0.5%的发酵银杏叶有助于石斑鱼抗亚硝酸盐胁迫,提高石斑鱼胁迫环境下肝脏的抗氧化能力。综上所述,在10种中药发酵制剂中,发酵银杏叶和发酵甘草能显著提高肝细胞的存活率、能较好的对石斑鱼肝细胞的氧化损伤模型起到保护作用;饲料中添加发酵银杏叶和发酵甘草各组中,添加0.5%的发酵银杏叶其对肝脏的保护作用最好;在亚硝酸盐胁迫下,添加0.5%的发酵银杏叶对石斑鱼的存活率、肝脏抗氧化能力的提升最佳。