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断奶应激导致仔猪肠道损伤,DSS诱导的小鼠肠道损伤可用于研究仔猪肠道损伤的模型。前期研究表明黄酮类化合物花旗松素(Taxifolin,TAX)可以缓解DSS诱导的小鼠肠道损伤,改变肠道微生物区系组成。花旗松素吸收率低,它是否通过肠道菌群发挥缓解肠道损伤的作用,值得进一步研究。本试验利用DSS诱导的小鼠肠道损伤模型,结合FMT和16S rDNA扩增子测序,基于肠道微生物研究花旗松素缓解肠道损伤的效果,为缓解断奶仔猪肠道损伤提供参考数据。试验共分为两个部分:试验一花旗松素对葡聚硫酸钠(DSS)诱导的小鼠肠道炎症损伤的效果研究30只ICR雄性成年小鼠(7~8周龄,约30±2 g BW),随机分为3组,分别是对照组,DSS组,DSS+TAX组(简称TAX组),每组10个重复DSS组和TAX组在8d~14d自由饮用含3%DSS(w/v)蒸馏水,DSS组每天灌胃200 μL蒸馏水,TAX组每天灌胃200 μL TAX液(100 mg TAX/kg BW);对照组一直清洁饮水,每天灌胃200 μL蒸馏水,试验期共14d。第15d处死小鼠后测量结肠长度,并分析肠道菌群结构。结果显示,相比于对照组,DSS组小鼠体重显著下降,DAI指数升高,结肠长度缩短,血清中炎症因子的浓度增加,抗炎因子IL-10的浓度降低,结肠组织中SIgA的分泌量降低,且p65和IκB蛋白的磷酸化程度显著增加。TAX处理显著增加了小鼠体重(P<0.05),降低DAI指数(P<0.05),增加结肠长度(P<0.05),增加免疫球蛋白(P<0.05)的分泌量以及抗氧化因子SOD(P<0.05)的含量,且可以显著减少p65和IκB蛋白的磷酸化(P<0.05),此外TAX还可以显著增强结肠紧密连接蛋白Occludin和Claudin-1的表达量(P<0.05)。在门水平,DSS处理后,显著增加了 Bacteroidetes的丰度,而TAX处理显著降低了 Bacteroidetes的丰度。在属水上,DSS处理显著增加Coprobacillus spp和Dehalobacterium spp的丰度,而添加TAX显著降低了这两种菌的丰度。此外,添加TAX显著增强了Anaeroplasma spp的丰度。在种水平上,添加 TAX 使 Clostridum ramosum、Clostridum saccharogumia 和Sphingobacterium multivorum的丰度显著降低,Desulfovibrio C21 c20和 Gemmiger formicilis的丰度显著增加。试验一结果表明花旗松素对DSS诱导的小鼠肠道炎症有治疗效果,并且可以改变微生物的组成和功能。试验二移植-灌服花旗松素小鼠粪菌对DSS诱导的小鼠肠道炎症的效果研究为了验证微生物是否在花旗松素治疗DSS诱导的小鼠肠道炎症中发挥作用,取35只C57BL/6雌性小鼠(8周龄,约26±2 g BW),随机分为对照组,DSS组,DSS+TAX组(简称TAX组),对照组粪菌移植组(移植了对照组小鼠粪菌组,简称FC组)和花旗松素粪菌移植组(移植花旗松素组小鼠粪菌组,简称FT组),每组7个重复、每个重复一只小鼠,试验期共14d。DSS组、TAX组、FC组、FT组在1d~7d自由饮用含5%DSS(w/v)蒸馏水,且DSS组在8d~14d每天灌服150 μL蒸馏水,TAX组在8d~14d每天灌服150 μL 100 mg/kg BW的TAX,FC组在8d~14d每天灌服150 uL 100mg/mL的对照组粪便混合液,FT组在8d~14d每天灌服150 uL 100mg/mL的TAX组粪便混合液;对照组一直饮用清洁饮水,每天灌胃150 μL蒸馏水,所有小鼠均自由采食。处死小鼠后测量结肠长度,并分析肠道菌群结构。结果表明,试验期间对照组小鼠平均每只体重增加了 0.32±0.01 g,而DSS处理组小鼠在试验期间平均每只体重减少了 3.54±0.07 g,降低程度显著高于FC组(1.86±0.11 g,P<0.05)和FT组(1.63±0.14 g,P<0.05),且DSS处理后,小鼠结肠组织出现显著的损伤,组织学评分(2.86±0.63)显著高于 FC(1.57±0.49 g,P<0.05)和 FT(1.14±0.64 g,P<0.05);DSS组小鼠肠道组织中GPR41和GPR43的表达量显著低于FC和FT组(P<0.05),结肠中炎症因子的水平显著高于FC和FT组(P<0.05),丁酸、异丁酸、异戊酸的含量显著低于FC和FT组(P<0.05)。此外,DSS处理显著降低了unculturedbacteriumfMuribaculaceae和 Akkermansia 的丰度,FMT 处理后,显著增加了RuminococcaceaeUCG-014的丰度,并且降低了 Bacteroides的丰度。此外,FMT处理可以显著增加碳水化合物代谢途径水平。结论:花旗松素具有缓解小鼠肠道炎症损伤的效果。肠道菌群可能是花旗松素的作用靶点,花旗松素通过增加RuminococcaceaeUCG-014菌丰度,增加丁酸的丰度,上调GPR41和GPR43的表达量,抑制NF-κB介导的炎症途径,降低炎症因子的表达从而发挥抗炎作用。