二氧化碳气腹对恶性肿瘤腹腔肝脏血流动力学、局部免疫功能和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的影响

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腹腔镜手术与传统的开腹手术相比,以其损伤小、易恢复、并发症少等优点使其在近年来的妇科手术中得到越来越广泛的使用。随着腹腔镜设备、技术不断的改进与完善及患者对生存质量要求的提高,腹腔镜手术逐渐应用于妇科恶性肿瘤,并取得了相应的进展。但随着腹腔镜在妇科恶性肿瘤的诊断和治疗中应用的增多,在临床和实验研究中,有关在CO2气腹条件下恶性肿瘤生长加快、易复发以及穿刺点的肿瘤种植转移率升高的报道也越来越多,其中尤以腹腔镜手术中所使用的人工气腹介质CO2能否促进腹腔恶性肿瘤细胞的生长和转移。本研究通过模拟CO2气腹环境来观察气腹对腹腔肝脏血流动力学、局部免疫功能和缺氧诱导因子1α(HIF—1α)的影响。一、CO2气腹对腹腔肝脏血流动力学的影响目的:研究CO2气腹对小型猪肝脏血流动力学的影响。方法:通过测定CO2气腹组、开腹组和对照组作用下吲哚氰绿负荷实验15min滞留率(R15ICG),以了解肝脏血流量的变化。结果:CO2气腹组R15ICG为61.3787±10.5965%,开腹组R15ICG为31.5613±5.4428%,对照组R15ICG为8.2648±4.023%,三组有显著差异(P<0.01)。结论:CO2气腹条件下可以引起肝脏血流量的减少。二、CO2气腹对腹腔恶性肿瘤生长、缺氧诱导因子1α(HIF—1α)的影响目的:研究腹腔注入恶性肿瘤细胞后在CO2气腹、开腹和对照条件下腹腔肿瘤的生长情况和对HIF—1α的影响。方法:1.30只裸鼠分成3组,每组10只,第1组为CO2气腹组,第2组为开腹组,第3组为对照组。术前30分钟每只裸鼠腹腔注入1×106个卵巢癌HO—8910细胞,术后3周处死裸鼠,打开腹腔,对比3组裸鼠腹腔肿瘤生长情况。2.取出肿瘤组织,通过RT-PCR半定量方法和免疫组化法(ABC法)测定三组肿瘤组织中的HIF-1α的表达。结果:1.第1组腹腔肿瘤的平均重量为0.4063±0.1228g,第2组腹腔肿瘤平均重量为0.1658±0.0323g,第3组腹腔肿瘤平均重量为0.1599±0.0385g,第1组腹腔肿瘤平均重量与第2组、第3组相比差异显著(P<0.0 1),而第2组、第3组腹腔肿瘤平均重量相比差异无显著性(P>0.05)。2.HIF—1α在CO2气腹组的表达明显高于开腹组和对照组(P<0.01)。结论:CO2气腹可促进腹腔恶性肿瘤的生长和增加HIF—1α的表达。三、CO2气腹对腹腔恶性肿瘤局部免疫功能的影响目的:研究腹腔注入恶性肿瘤细胞后在CO2气腹、开腹和对照条件下对局部免疫功能的影响。方法:30只裸鼠分成3组,每组10只,第1组为CO2气腹组,第2组为开腹组,第3组为对照组。术前30分钟每只裸鼠腹腔注入1×106个卵巢癌HO—8910细胞,术后3周处死裸鼠,打开腹腔,取出肝脏、脾脏和腹膜组织,制成单细胞悬液,通过流式细胞仪测定肝脏、脾脏和腹膜组织的CD3、CD4、CD8、IL-1、IL-6和TNF的百分比值。结果:1.腹膜组织:1)第1、2、3组CD3分别为32.0170±26.6968%、36.6740±19.2043%、22.3650±11.3707%,三组之间相比差异无显著性(P>0.05);2)第1、2、3组CD4分别为6.7510±3.6404%、17.9390±13.7102%、20.5210±13.8193%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05);3)第1、2、3组CD8分别为31.792±25.1291%、33.8750±21.0261%、35.6390±27.4650%,三组之间相比差异无显著性(P>0.05);4)第1、2、3组IL-1分别为6.0920±4.3477%、15.4710±13.2542%、16.4090±6.9896%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05);5)第1、2、3组IL-6分别为30.8420±7.2334%、49.6880±19.7085%、52.1170±20.0032%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05);6)第1、2、3组TNF分别为18.1990±8.6447%、38.1260±20.0599%、41.3510±23.9298%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05)。2.肝脏组织:1)第1、2、3组CD3分别为12.4790±7.1641%、7.6180±5.6357%、8.5220±7.6436%,三组之间相比差异无显著性(P>0.05);2)第1、2、3组CD4分别为6.4090±4.9043%、7.1910±7.3233%、5.7460±3.7128%,3组之间相比差异无显著性(P>0.05);3)第1、2、3组CD8分别为16.2790±17.9420%、13.7910±12.7805%、17.3740±16.6356%,三组之间相比差异无显著性(P>0.05);4)第1、2、3组IL-1分别为2.3640±1.9831%、15.0340±13.5875%、15.9320±6.0313%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05);5)第1、2、3组IL-6分别为4.3780±3.5243%、32.0160±29.4261%、35.8680±23.2400%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05);6)第1、2、3组TNF分别为11.5800±16.8643%、38.6710±26.6496%、42.0980±14.9064%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05)。3.脾脏组织:1)第1、2、3组CD3分别为9.0750±4.3234%、22.6930±18.6408%、27.4340±16.4955%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05);2)第1、2、3组CD4分别为3.8840±1.8032%、7.9540±3.5062%、8.4400±5.7831%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05);3)第1、2、3组CD8分别为6.8170±2.8267%、23.3840±24.1522%、25.1030±18.7527%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05);4)第1、2、3组IL-1分别为1.7830±1.6454%、4.7250±3.6248%、5.8550±3.8422%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05);5)第1、2、3组IL-6分别为5.8200±5.8084%、23.1750±27.7700%、27.8880±15.5849%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05);6)第1、2、3组TNF分别为10.4900±10.8712%、35.4180±26.0778%、37.5200±26.9280%,第1组与第2、3组相比差异显著(P<0.05),第2组和第3组相比差异无显著性(P>0.05)。结论:CO2气腹可以降低腹腔的局部免疫功能,从而有可能促进腹腔恶性肿瘤的生长。
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