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目的:以3周龄SD大鼠作为研究对象,采用α-萘异硫氰酸酯ANIT诱导大鼠患肝内胆汁淤积症,较好模拟临床上新生儿胆汁淤积症;再通过垂盆草苷作用肝内胆汁淤积动物模型后探讨垂盆草苷对其是否具有调节作用与具体通过什么机制来发挥作用。方法:1.将48只3周龄SD大鼠随机分组,分为6组,每组8只大鼠,即对照组(Control组)、α-萘异硫氰酸酯ANIT模型组(Model组)、熊去氧胆酸组(UDCA组)、垂盆草苷低、中、高剂量组。2.第1日晨,Control组与Model组灌胃等容量的CMC-Na溶液,UDCA组与SA各组给予相应的阳性对照药物(100 mg/kg)和实验药物;按第1日方法,随后每日准时给予大鼠相应剂量的药物,持续至第5日。第5日晚,除对照组外,给予ANIT构建肝内胆汁淤积的动物模型。3.随后第6、7日除对照组与模型组给予相同容量的食用橄榄油外,UDCA组与SA处理各组继续给予相应的药物处理。4.最后一次给药12 h后测定幼龄大鼠在0-45 min内的胆汁恢复情况;采血并离心取上层血清,检测血清中反应肝脏功能的相关生化指标含量。5.取固定后的肝脏组织制作成病理切片进行HE染色;再将新鲜的肝脏组织制作成10%的组织匀浆液,分别检测氧化应激酶与保护性抗氧化酶在匀浆中的含量。6.取离心后的上层血清并应用检测试剂盒测定血清中3种常见的炎症因子的水平。7.采用Western blot法分析与胆汁酸合成、转运相关的FXR信号通路及下游蛋白情况,对此进行定性与半定量的分析。结果:1.模型组与对照组进行比较,模型组的胆汁流量显著地降低;血清中反应肝脏功能的各项生化指标ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL、TBA的含量均出现显著增加的趋势。SA各组与Model组相比较,胆汁流量出现不同程度的增加;血清中ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL、TBA水平下降,呈现出剂量依赖性。2.模型组较对照组,肝脏组织HE染色可直观地反映肝脏损伤较严重;组织匀浆中氧化应激酶MDA的含量明显上升,而保护性的抗氧化应激酶SOD和GSH-Px含量却降低。SA各组与Model组相比较,肝脏组织病理损伤改善;组织匀浆中氧化应激酶MDA含量明显降低,保护性的抗氧化应激酶SOD和GSH-Px水平却出现显著升高的趋势(P<0.05、P<0.01)。3.与对照组相较,被检测的3项炎症因子TNF-α、INF-γ、IL-1β在模型组血清中的表达量呈现出明显上升趋势;不同剂量SA各组血清中TNF-α、INF-γ、IL-1β的表达水平却出现与模型组相反的趋势,表现出剂量依赖(P<0.05、P<0.01)。4.与Control组相比较,Model组的FXR、SHP-1、SHP-2、MRP2、BSEP、NTCP蛋白表达降低,CYP7A1、CYP27A1的表达升高;SA各组与Model组相比较,FXR、SHP-1、SHP-2、MREP2、BSEP、NTCP表达增加,而CYP7A1、CYP27A1的表达降低。结论:通过ANIT诱导可以成功地构建肝内胆汁淤积动物模型;通过上述胆汁流量测定、血清生化、病理切片、炎症因子及氧化应激指标结果显示垂盆草苷对胆汁淤积有一定的治疗效果,垂盆草苷高剂量组对肝内胆汁淤积改善效果与UDCA对照组相似;垂盆草苷可以通过:1)上调激活FXR受体,激活下游基因SHP-1、SHP-2的表达,降低CYP7A1、CYP27A1胆汁酸合成限速酶,减少胆汁酸在肝细胞中生成;2)激活FXR受体,上调MRP2蛋白的表达,增加BSEP的含量,增加胆汁酸从肝细胞中泵出;3)激活FXR,上调下游基因SHP-1、SHP-2,增加NTCP进而影响胆汁酸的摄取。说明垂盆草苷对ANIT所诱导的幼龄SD大鼠的肝内胆汁淤积有一定的改善作用,可能是通过FXR信号通路调节胆汁酸的合成与转运而发挥其治疗作用。