结肠癌是一种常见且恶性程度较高的消化道肿瘤。发病率居消化系统恶性肿瘤首位。目前,结肠癌的主要治疗方法是以手术治疗为主,结合放射治疗、化学治疗、免疫治疗、分子靶向治疗及中医药治疗等多手段综合治疗。因结肠癌的早期症状不明显及国内患者缺乏常规早期筛查,以至于在结肠癌患者确诊时,病情大多已发展到中晚期,严重威胁患者生命。尽管近年来结肠癌的治疗取得了进展,但其预后仍不理想,而手术后的转移性复发是死亡的主要原因。因此,明确结肠癌的发生发展过程,探索新的结肠癌分子生物标志物,进行敏感、有效的早期诊断和预后评估,对于结肠癌的治疗效果和预后改善具有重要意义。Sno RNA是一类广泛存在于真核生物细胞核仁的小分子非编码RNA,其在尿液、痰液、血浆、血液中稳定存在,这意味着sno RNA作为早期疾病诊断以及疾病预后的分子标志物的潜在价值。目的:本研究通过nr StarTMHuman sno RNA PCR芯片筛选出结肠癌组织与癌旁组织中差异表达的sno RNA分子,对筛选出来的sno RNA分子在结肠癌的临床样本以及细胞系中做进一步验证和分析,探讨其在结肠癌中的生物学特征以及作用机制,为结肠癌前期的诊断以及后期的治疗提供新的视角。方法:1.收集来自辽宁省肿瘤医院大肠外科由病理确诊为结肠癌患者的27对癌与癌旁组织标本。2.随机筛选3个已经由病理确诊为结肠癌患者的癌与癌旁组织,通过nr StarTMHuman sno RNA PCR芯片技术以及生物信息学方法筛选出在结肠癌中差异表达的sno RNA,通过real-time q PCR进行验证,最终筛选出SNORA28作为本研究的sno RNA分子。同时,查阅癌症基因组图谱TCGA数据库,对肿瘤的相关数据做进一步分析,确定SNORA28在其他肿瘤组织中的表达情况。3.通过real-time q PCR验证SNORA28在27对结肠癌与癌旁组织中的表达情况,以及在结肠癌细胞系与正常结肠上皮细胞中的表达情况。同时根据癌症基因组图谱TCGA数据库里结肠癌数据信息进一步分析,其中共452例结肠癌患者,剔除其中不完整的患者数据,最终277例结肠癌患者的数据信息纳入本研究。详细分析SNORA28的表达情况与结肠癌患者的临床病理特征与预后生存之间的关系,探究其对临床研究的潜在价值。4.选择HCT116与HT29两种结肠癌细胞株进行后续的细胞表型实验。通过感染慢病毒以及转染ASO敲低序列对SNORA28进行过表达以及敲低,进行CCK8实验、克隆形成实验、细胞周期和细胞凋亡实验,检测在过表达以及敲低SNORA28后对结肠癌细胞增殖能力、克隆形成能力、迁移与侵袭、细胞周期、细胞凋亡的影响。5.HCT116细胞感染慢病毒以及转染ASO敲低序列进行SNORA28的过表达以及敲低,其过表达以及敲低效果通过real-time q PCR验证,后期分别对过表达以及敲低SNORA28的HCT116细胞进行转录组测序,进行差异表达的基因GO富集以及信号通路富集分析,进一步验证,确定SNORA28调控结肠癌细胞生长的分子机制。结果:1.对结肠癌患者的癌与癌旁组织进行nr StarTMHuman sno RNA PCR芯片检测,数据统计后发现在结肠癌组织共有142个sno RNA差异表达,其中表达上调的有75个,表达下调的有67个。2.对TCGA数据库中的肿瘤数据进行分析,发现SNORA28在多种肿瘤中均高表达。3.扩大样本验证了SNORA28在结肠癌组织以及结肠癌细胞系中均高表达。4.通过ROC曲线、Kaplan-Meier分析、Cox回归分析评估了SNORA28的表达水平与临床病理参数之间的关系,表明SNORA28的表达与不良预后相关。5.过表达SNORA28能够促进结肠癌细胞的增殖、克隆形成以及裸鼠成瘤能力,敲低SNORA28能够显著抑制结肠癌细胞的增殖、克隆形成能力同时诱导结肠癌细胞发生凋亡。6.对过表达以及敲低SNORA28的HCT116细胞进行转录组测序分析,差异基因进行信号通路富集发现富集到JAK-STAT信号通路,过表达SNORA28能够激活JAK-STAT信号通路及下游蛋白而促进结肠癌进展。结论:1.SNORA28在结肠癌组织以及结肠癌细胞株中均高表达,SNORA28的表达与结肠癌不良预后相关,可作为结肠癌诊断与预后的潜在生物标志物。2.SNORA28的表达增加后能够促进结肠癌细胞的增殖、克隆形成以及裸鼠成瘤能力,反之,则起到抑制作用;转录组测序和验证分析发现SNORA28可以激活JAK-STAT途径,与正常结肠上皮细胞相比,结肠癌细胞中SNORA28与STAT3蛋白均呈现高表达,提示SNORA28可能通过激活JAK-STAT信号通路进而促进结肠癌细胞的生长。