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CD28所诱导的白细胞介素(IL-2)的转录后调控被认为是与IL-2 mRNA3’UTR区的富集腺嘌呤尿嘧啶保守区域(AU-rich elements,AREs)相关的。与ARE结合的蛋白(AU-binding protein,AUBP)能调节mRNA去腺苷酸,改变mRNA降解的速率,磷酸化AUBPs可以稳定mRNA。NFAR1是一个与IL-2 mRNAARE区结合的AUBP,在过量表达时可以稳定IL-2 mRNA。NFAR1基因编码区含有一个保守的AKT底物序列,其中S647位是AKT保守的磷酸化位点。在本文中证实了AKT与NFAR1相互作用的,并共定位于细胞核,并用体外实验和体内实验证明了AKT确实可以磷酸化NFAR1的S 647位。为了进一步说明AKT磷酸化NFAR1的生理意义,我们检测了外源表达NFAR1野生型,失磷酸化突变型NFAR1-S647A及模拟S647被磷酸化的假磷酸化突变型NFAR1-S647E对IL-2 mRNA半衰期的影响。其中野生型可以稳定IL-2mRNA,NFAR1-S647A则和空载体CMV-Myc类似,稳定IL-2 mRNA能力很低;而转染NFAR1-S647E的细胞中IL-2 mRNA稳定性与野生型近似,略高于野生型。我们还观察到AKT和野生型NFAR1共转的Jurkat细胞中IL-2mRNA稳定性要远远高于AKT和NFAR1S647A共转的细胞,也高于单转NFAR1的细胞;P13-K通路的抑制剂LY290042抑制NFAR1野生型稳定IL-2 mRNA的功能,NFAR1-S647A则对LY290042不敏感。通过上述实验证明了AKT通过磷酸化NFAR1 S647调节IL-2mRNA的稳定性。我们进一步检测CD28刺激信号对NFAR1磷酸化程度的影响以及NFAR1S647位的磷酸化对CD28所介导的IL-2转录后调控所起的作用。发现CD28刺激后,NFAR1的磷酸化水平明显增加,而且这种增加是伴随着ART磷酸化水平增加的;一旦AKT被抑制,S647位的磷酸化水平也随之下降。放射免疫方法检测到NFAR1野生型和NFAR1-S647A对CD28所诱导的转录后调控有明显的不同。NFAR1可以稳定IL-2 mRNA并提高蛋白表达量,突变型则没有这样的作用,这说明NFAR1S647位的磷酸化对CD28稳定IL-2 mRNA非常重要。根据上述的研究结果,我们提出了一条CD28稳定IL-2 mRNA可能的分子通路;CD28刺激激活AKT,活化的AKT进入细胞核内磷酸化NFAR1 S647位,促使IL-2 mRNA稳定性增加。