半胱胺对瘘管手术后山羊外周血T淋巴细胞增殖的影响及其机理研究

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为了研究半胱胺对山羊瘘管手术后T淋巴细胞增殖的影响及其机理研究,本文进行了如下试验:试验一:口服半胱胺盐酸盐对瘘管手术后山羊外周血T淋巴细胞增殖及血清中几项指标的影响8只本地山羊分为试验组和对照组,分圈饲养,每只羊分别先后施行瘤胃、十二指肠瘘管手术。术前每只山羊每天饲喂精料300g,自由采食花生杆和饮水,瘤胃瘘管安装手术前第3天试验组在精料中添加半胱胺盐酸盐微胶囊45mg/kg·BW·d(CT2000,含半胱胺30%),并持续添加直至试验结束;瘤胃术手后恢复14天,安装十二指肠瘘管,恢复期与手术后饲喂方案同瘤胃手术。分别于瘤胃手术前第3天、术后1、2、3、4、8天,十二指肠手术前、术后1、3、8天颈静脉无菌采血,检测外周血T淋巴细胞转化率。另外采集部分血液,分离血清,检测血清中IL-2和GSH含量。结果显示,对照组瘤胃手术后1天T淋巴细胞转化率下降了60.52%(P<0.05),此后逐渐恢复,但术后8天仍低于术前水平;十二指肠手术后1天T细胞转化率也显著下降(31.73%,P<0.05),于第8天恢复,表明手术应激抑制了外周血T淋巴细胞的增殖功能。在口服半胱胺盐酸盐山羊观察到手术对外周血T淋巴细胞增殖的影响较小,与未施加手术相比,两次手术后的T淋巴细胞转化率均无显著改变,且有逐渐上升的趋势。组间相比,试验组T淋巴细胞转化率在瘤胃手术后1、2、3、4、8天分别比对照组高151.66%、52.07%、30.17%、96.96%和120.04%(P<0.05)。十二指肠手术前和术后1、8天也显著高于对照组148.28%、58.92%、55.36%(P<0.05)。表明半胱胺提高手术后T淋巴细胞的增殖能力,缓解手术造成的细胞免疫抑制。瘤胃手术后第1天,对照组血清中IL-2含量有下降的趋势(31.54%,P=0.121),在十二指肠手术后也有所下降。而试验组在两次手术后IL-2含量均无明显变化(P=0.984,P=0.776)。组间相比,血清中的IL-2含量在瘤胃手术后第1天和十二指肠手术后第1天,试验组显著高于对照组(P<0.05),在十二指肠手术后第3天,也趋向于高于对照组(P=0.142)。提示手术创伤可引起血清中IL-2含量的下降,口服半胱胺盐酸盐可以阻止手术创伤引起的血清中IL-2含量的下降。瘤胃手术后第1天,对照组血清中的GSH含量显著下降(35.90%,P<0.05),在十二指肠手术后也有所下降。试验组在瘤胃手术后第1天无明显变化(P=0.439),在十二指肠手术后显著下降(45.35%,P<0.05),与其在术前水平较高有一定的关系,但恢复较快,在术后三天已高于术前水平。组间相比,十二指肠手术后第3天,试验组显著高于对照组14.67%(P<0.05);在瘤胃手术后第1天、十二指肠手术后第8天有高于对照组的趋势(0.05<P<0.15)。提示手术创伤可引起机体抗氧化能力的下降,口服半胱胺盐酸盐通过提高血清中的GSH含量提高机体的抗氧化能力。试验二:半胱胺影响外周血T淋巴细胞增殖的体外研究无菌采集山羊新鲜肝素抗凝血,分离得到淋巴细胞。细胞分为对照组(培养液)和半胱胺组(半胱胺40μg/m1)培养后检测其转化率和淋巴细胞内GSH含量。此外,分离的淋巴细胞分为对照组(培养液)和IGF-Ⅰ组(IGF-Ⅰ25ng/ml),培养后检测其转化率。结果显示,半胱胺组T淋巴细胞转化率高于对照组105.24%(P<0.05),同时,半胱胺显著地增加了T淋巴细胞内的GSH含量(225.94%, P<0.05); IGF-Ⅰ组T淋巴细胞转化率增加39.27%(P<0.05)。结果表明半胱胺可以直接刺激T淋巴细胞增殖,还可以通过增加T淋巴细胞内的GSH、或通过IGF-Ⅰ系统而间接促进T淋巴细胞增殖。综上所述,半胱胺促进手术后山羊外周血T淋巴细胞增殖、增强免疫功能的作用可经多条途径实现,除了直接刺激作用外,半胱胺也可通过GSH、IL-2或IGF-Ⅰ介导而增强细胞免疫功能。
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