埃博拉病毒是一种具有高度传染性的病毒,被世界卫生组织宣告为生物安全四级的病毒,感染以后通常表现为出血热、头痛恶心、呕吐、皮疹等症状,严重者会出现多个器官受损,部分病例还可出现内脏大量出血。埃博拉病毒感染后有一定的潜伏期,一般为5-10天,个别感染者可达到21天,具有很高的死亡率。2014年,埃博拉病毒在西非地区出现了大规模的爆发,并且传播迅速,病死率在50%-90%之间,这是有记录以来最为严重的一次。在2017年西非国家又爆发了埃博拉病毒疫情,并且2018年也有人陆续感染死亡,目前还没有有效的药物能够治疗埃博拉病毒。埃博拉病毒的自然宿主目前并不是非常清楚,但是之前有一些研究发现猴子、猩猩等非人灵长类动物以及啮齿类动物可能是埃博拉病毒的潜在宿主。埃博拉病毒能够编码七个结构蛋白和一个非结构蛋白,其中GP基因能够编码两种蛋白质,分别为分泌形式sGP和跨膜形式的GP。GP是跨膜糖蛋白,在病毒的入侵以及诱导产生抗体等过程发挥着重要的作用,是目前抗体治疗以及疫苗研制的主要靶蛋白,分泌型的sGP蛋白含有糖帽结构,与GP蛋白共用一个N端,其序列相对保守,主要介导膜的融合。在本文研究中,我们诱导并产生了埃博拉病毒的特异性单克隆抗体,并对其特异性和功能进行了相关的鉴定工作,为以后埃博拉病毒的快速检测方面以及治疗方面奠定了基础。首先,我们构建并表达了埃博拉病毒的糖蛋白（GP）和分泌型糖蛋白（sGP）的质粒,并分别在HEK 293T和293F细胞中表达。通过DNA免疫的方式将质粒GP免疫了 BALB/c小鼠,并用纯化后的sGP加强免疫小鼠,从而产生针对于埃博拉GP的高亲和力和特异性的抗体。Western blot,免疫荧光等实验均证明小鼠的血清能够与GP和sGP都发生特异性反应,ELISA结果显示小鼠血清能够和sGP特异性结合,稀释比例大于1:10000。同时,我们构建了埃博拉假病毒并进行中和实验,结果显示小鼠血清内含有中和性抗体。将具有中和活性的小鼠进行杂交瘤融合实验,经过ELISA筛选我们获得了两株单克隆抗体T231,T242。同样进行了单克隆抗体的特异性检验,实验结果显示两株单克隆抗体T231和T242均与GP和sGP有特异性反应,且两株单克隆抗体都能够与纯化的sGP蛋白特异性结合,两株单克隆抗体的反应浓度在0.005 μg/ml-0.03μg/ml之间。ELISA实验分析鉴定两株单克隆抗体T231和T242的分型为IgG2a。同时,我们进一步确认单克隆抗体T231和T242均能够特异性识别埃博埃拉假病毒。此外,我们将单克隆抗体T231进行了生物素标记,通过ELISA竞争实验进行生物素-亲和素显色分析,检测加入T242后对T231抗体与sGP结合的影响,结果显示两株单克隆抗体与sGP的结合表位为不完全重叠,存在竞争性。